불멸화된 악성구상상피에 대한 Retinoic Acid의 세포활성 및 유전자 발현 연구 = Gene Expression and Viability of The Retinoic Acid In Human Immortalized & Malignant Oral Keratinocytes
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학술지명
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발행연도
2003
작성언어
Korean
주제어
KDC
515.000
자료형태
학술저널
수록면
205-231(27쪽)
제공처
cDNA microarray allows to monitor the expression of thousthand genes simultaneously and has been successfully to explore the gene expression of carcinoma and other diseases. To identify and monitor gene expression profile changes in oral tumorigenesis and exposure to medicine may shed light not only on the cause of these pathological changes, but also provide the opportunity to identify novel targets for disease detection and intervention. Retinoids and interferon are important regulators of human epithelial cell differentiation and have been used successfully in the clinical treatment of HPV-involved cervical cancer. However, there is only a limited information available concerning to the effect or role of retinoic acid in oral precancerous and cancer cells. We studied the effect of retinoic acid on normal human oral keratinocyte(NHOK), HPV-16 E6E7 immortalized human oral keratinocyte(IHOK), and two oral squamous cell line(HNSCC30, HNSCC31) according to the carcinogenesis stage. The RA effect was evaluated by MTT assay and microarray. Complementary DNA microarray including 400 genes was used to systematically characterize the variation in gene expression patterns of RA treated IHOK cells vs. control IHOK cells .
The results were as follows:
1. RA has negative effect on growth for all NHOK, IHOK, HNSCC30 and HNSCC31 dependently on the concentration and cultivation time.
2. We identified 18 clones cDNA exhibiting more than 2 fold overexpression in RA treated IHOK probes relative to control probe, 21 cDNA s reveal more than 2 fold overexpression in control IHOK relating to the experimental cells. Pearson correlation coefficients for the set of selected spots from duplicated hybridization was 0.86.
3. Examination of gene expression that differs between RA treated IHOK and control IHOK cells apprear to be related to : cell cycle regulator, cell growth and apoptosis, cell adhesion, signal transduction and miscellanous.
4. Cell cycle regulator uprgulation is noted in MAD2, CDK9, Cdc20, Cdc2, CDK inhibitor 1A, and only HUS-1 is downregulated.
5. Cytochrome P450 and interleukin 1-alpha for cell growth and apoptosis factor was upregualted, and capase 8 & FADD apotosis regualtor gene was decreased expression, so we observed increased apoptosis mecahnism and resistance to apoptosis.
6. Cytokine upregulation in RA treated IHOK was noted in interIeukin 1 alpha, downregualtion was in interleukin 8, interleukin 10, interleukin 10 receptor, interleukin 3 receptor, interleukin 9 receptor, and interleukin 19
7. Signal transducers including JAK binding protein, STAT1, and Burkitt lymphoma receptor were upregulated with RA reated IHOK , suggesting the RA regulates the JAK/STAT signal-transduction pathway.
In conclusion, we have demonstrated the high-throughput utility of cDNA array hybridization in parallel to the gene expression analysis to identify genes that are expressed differentially in RA treated with HPV16 immortalized keratinocytes. The differentially expressed genes identified here should be informative in oral epithelial cell carcinogenesis.
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