1996년 부산시에서 집단발생한 장티푸스 환자들로부터 분리한 Salmonella typhi의 PFGE양상, Phage형 및 항균제감수성 = Pulsed-Field Gel Electrophoresis Pattern, Phage Type and Drug Susceptibility of Salmonella typhi Isolates from an Outbreak in Pusan City in 1996
목적: 1996년 4월부터 6월사이 부산시 수영구에서 집단 발생한 장티푸스 환자로부터 분리된 장티푸스균 48주를 대상으로 phage형 시험 및 염색체 DNA를 제한효소로 처리 후 PFGE를 시행, 그 양상을 분석, 역학적 도구로서의 유용성을 검토하고 장티푸스 치료의 효율적 약제선택의 기초 자료로 제공하고자 항생제 감수성시험을 하였다.
방법: 항생제 감수성 시험은 장내세균 감수성 시험에 권장되고 있는 ampicillin외 14종의 항균제에 대하여 NCCLS 표준 디스크 확산법으로 수행하였다. phage형 시험은 영국 중앙 공중 보건 실험실(PHRL)에서 분양 받은 phage액을 사용하여 시험하였다. PFGE 시험은 장티푸스균 염색체 DNA를 제한효소 Spe Ⅰ으로 처리후 PFGE를 수행, 그 영동상을 관찰 분석하였다.
결과: 시험대상 장티푸스균 48주중 ampicillin의 14종의 항균제에 내성을 보인 균주는 없었다.
phage형은 비분류주(untypable)가 44주였고 M1이 2주, 그리고 E1형이 2주였다. PFGE양상 분석결과 A group(47주) 및 B group(1주)의 2가지 group으로 분류되었으며 A group은 A1(42주), A2(1주), A3(3주) 및 A4(1주) 등 4가지 subgroup으로 분류되었다. A group의 각 subgroup사이의 유전적 유사도(F치)는 0.8-0.897으로 유사도가 높았으나 A group의 각 subgroup과 B group간의 F치는 0.20-0.258로 유전적 근연 관계가 낮았다.
결론: 1996년 4월부터 6월사이 부산시 수영구에서 집단 발생한 장티푸스 초발 환자는 장티푸스균이 분리된 환자를 대상으로 장티푸스균의 PFGE양상 분석 결과 발병일(1996년 4월 23일)이 가장 빠른 것으로 신고된 남성 환자로 추정되었다. 염색체 DNA를 Spe Ⅰ제한효소로 처리 PFGE를 수행, 그 양상을 분석하는 방법이 장티푸스 집단발생시 감염원 및 유행전파 경로 추적등 역학적 분석에 유용성이 큰 것으로 밝혀졌다. 본 실험에 사용된 장티푸스 분리균은 장내세균 약제 감수성 시험에 일반적으로 권장되고 있는 ampicillin외 14종의 항균제에 내성을 나타낸 균주는 검출되지 않았으나 항균제 남오용 및 해외로부터 약제 내성 장티푸스균의 유입으로 약제 내성 장티푸스 출현 감시에 능동적 대처가 요망된다.
Background: During the period from April to June 1996, an outbreak of typhoid fever occurred in SuYoung-Ku, Pusan city. We performed the molecular epidemiological analysis and drug susceptibility test for 48 isolates of Salmonella typhi from the outbreak.
Methods: Chromosomal DNA of S. typhi was digested with the restriction endonuclease Spe Ⅰ and the resulting restriction polymorphism was observed on pulsed field gel electrophoresis(PFGE). Phage typing was performed using Vi-phages, and antimicrobial susceptibility test was done by Disc diffusion method.
Results: On phage typing, 2 isolates were M1 phage type, 2 E1 phage type and 44 untypable. The PFGE analysis on 14 to 16 chromosomal DNA restriction fragments ranged from 50Kb to 1000kb showed 2 different patterns of restriction fragments, divided into group A and B. Forty-seven isolates belonged to group A that were subgrouped into A1(42 strains), A2(1 strain), A3(3 strains), A4(1strain), and one strain was grouped into group B. in the F-value of genetic similarity of the epidemic S. typhi strains, there was low similarity(F value: 0.2-0.258) between group A strains and group B strains. However, the subgroup strains(A1-A4) showed high similarity(F value:0.8-0.897) each other. The drug susceptibility test showed susceptibility to ampicillin, carbenicillin, cephalothin, chloramphenicol, tobramycin, gentamycin, kanamycin, nalidixic acid, neomycin, polymyxin B, streptomycin, tetracycline, trime-thoprim-sulfamethoxazole, ciprofloxacin and norfloxacin.
Conclusion: This study showed that phage typing and PFGE were very useful as a tool to investigate molecular analyses of epidemic S. typhi strains this study.
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