SCIE
KCI등재
SCOPUS
Biopolymer 생산성 Bacillus 속 균주의 원형질체 형성과 재생 = Protoplast Formation and Regeneration of Bacillus strains producing biopolymer
저자
발행기관
학술지명
Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem)(Applied Biological Chemistry)
권호사항
발행연도
1999
작성언어
Korean
KDC
470
등재정보
SCIE,KCI등재,SCOPUS
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
20-28(9쪽)
제공처
소장기관
To improve Bacillus strains producing biopolymer, conditions for protoplast formation and regeneration were investigated in biopolymer producing Bacillus subtilis K-1 and lactose utilizing Bacillus coagulans. Bacillus subtilis K-1 mutant (SM-2) and Bacillus coagulans mutants (CM-12) were marked auxotrophic and antibiotics-resistant (SM-2) and an antibiotics-resistant mutants, respectively. To formate protoplasts derived from the mutants, conditions were established as follows. For B. subtilis mutant SM-2, its culture in mid-logarithmic phase was added with penicillin G (1.0 unit/㎖) and further reacted for 1.5 hr. Cells were collected and then treated in lysis fluid (pH 7.0) containing 0.4 M sucrose and lysozyme (25 ㎍/㎖) for 40 min at 37℃. Protoplast formation was very successful (99.6%) and the ratio of cell wall regeneration was 2.4%. For Bacillus coagulans mutant CM-12, its mid-logarithmic phase culture was treated with penicillin G (0.3 unit/㎖) and glycine (0.5%) for lhr. Cells were collected and then resuspended in lysis buffer (pH 7.0) containing 0.6 M lactose and lysozyme (300 ㎍/㎖) for 30 min at 37℃. Protoplast formation was also successful (90.8%) and cell wall regeneration ratio was similar to SM-2 (2.2%). To improve regeneration frequency, regeneration medium was obtained as followed condition,. Cell wall regeneration was improved 2-4 folds with 5.1% for B. subtilis SM-2 and 10.3% for B. coagulans CM-12 when protoplasts mixed with soft top agar(0.4%) was overlaid onto trypticase soy broth medium containing 0.4 M sucrose, 0.7% casamino acid, 1% PVP, 25 mM MgCl₂, 25 mM CaCl₂ and 1.5% agar.
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