Transcriptional regulation mechanism study of Sizzled(szl3.L) during Embryo development of xenopus laevis = Xenopus laevis 배아 발달 과정에서 Sizzled(szl3.L)의 전사 조절기전 연구
저자
발행사항
춘천 : 한림대학교 대학원, 2018
학위논문사항
학위논문(석사)-- 한림대학교 대학원 : 의학과 생화학전공 2018.8
발행연도
2018
작성언어
영어
DDC
572.8 판사항(22)
발행국(도시)
강원특별자치도
형태사항
40 p. : 삽화 ; 30 cm.
일반주기명
참고문헌 : p.33-35.
UCI식별코드
I804:42014-200000167240
소장기관
Sizzled (szl3.L) 는 BMP-4 신호 전달의 다운 스트림 타겟 인 분비 된 frizzled 관련 단백질입니다. BMP-4는 세포 운명 - 규격, 세포 분화, 축 형성 및 신경 억제와 같은 척추 동물의 초기 발달 동안 다양한 생물학적 과정에서 중요한 역할을하는 잘 알려진 신호 분자이다. 우리의 예비 자료는 Szl3.L의 이소성 발현이 Xenopus의 세포 수렴과 확장의 손상에 의해 원추형 결손을 유발한다는 것을 보여 주었다. 또한, ChIP-Seq 데이터는 Smad-1, Ventx1.1, Goosecoid (gsc), FoxD5b 및 Xbra가 szl3.L의 5 '측면에 직접 결합 함을 입증했다. 그러나, 상기 언급 된 전사 인자에 의해 조절되는 szl3.L의 상세한 분자 기작 연구는 아직 널리 알려지지 않았다. 현재 연구에서 우리는 Szl3.L 프로모터 내에서 BMP-4 반응 요소 (BRE)와 Ventx1.1 (PRE)를 동정하기 위해 szl3.L 프로모터 영역 (-1595bp)을 클로닝했다. 결과는 BMP-4가 직접 BRE를 함유하는 sz13.L (-370) 프로모터 구조물의 상대적인 프로모터 활성을 증가시키는 반면, Ventx1.1은 Xenopus 배아에서 sz13.L (-197) 프로모터 구조물의 상대적인 프로모터 활성을 감소시키는 것으로 나타났다. 또한 Gsc, Xbra 및 Smad-1은 Xenopus 배아에서 Sz13.L의 상대적인 프로모터 활성을 조절한다는것을 발견했다. 종합하면, 결과는 BMP-4가 VMZ에서의 소화 세포 이동을 억제하기 위해 Sz13.L 전사를 양적으로 조절한다는 것을 제시한다. 그러나 Ventx1.1이 Xenopus에서 Szl3.L 전사를 억제하는 이유는 의심 스럽다.
핵심어; BMP-4 signaling, Ventx1.1, Szl3.L, Smad1, Gastrulation, Fate determination
Sizzled (szl3.L) is a secreted frizzled related-protein, a downstream target of BMP-4 signaling. BMP-4 is a well-known signaling molecule playing roles in a variety of biological processes during early development of vertebrates, such as cell fate-specification, cell differentiation, axis formation and neural inhibition. Our preliminary data showed that ectopic expression of Szl3.L causes gastrulation defects by impairment of cell convergent and extension in Xenopus. In addition, our ChIP-Seq data demonstrated that Smad-1, Ventx1.1, Goosecoid (gsc), FoxD5b and Xbra directly bound within the 5’-flanking region of szl3.L. However, the detailed molecular mechanism study of szl3.L-regulated by the said transcriptional factors is still widely unknown. In the present study, we cloned szl3.L promoter region (-1595bp) to identify BMP-4 response elements (BRE) and Ventx1.1 (PRE) within the szl3.L promoter. Results showed that BMP-4 increased the relative promoter activity of szl3.L (-370) promoter construct contained direct BRE while Ventx1.1 decreased the relative promoter activity of szl3.L (-197) promoter construct in Xenopus embryos. Additionally, we found that Gsc, Xbra and Smad-1 regulated relative promoter activity of szl3.L in Xenopus embryos. Taken together, results suggested that BMP-4 positively regulates szl3.L transcription to inhibit gastrulation cell movement in VMZ. However, it is questionable that why Ventx1.1 inhibits szl3.L transcription in Xenopus.
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