Isoproterenol 및 Melatonin의 첨가농도와 난포란의 등급에 따른 돼지 단위발생란의 체외 발달
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2017
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Korean
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학술저널
수록면
82-82(1쪽)
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일반적으로 Isoproterenol은 melatonin의 합성과정에 있어서 melatonin을 활성화 시켜 그 활성도를 향상시키는 것으로 알려져 있다. Melatonin은 포유동물의 송과선에서 분비되 는 호르몬으로서 특히 난포액에서 높은 농도로 검출되며, 난자의 체외배양의 경우, 강력 한 활성산소가 청소부 작용을 하여 난자의 체외발달율을 개선시키는 역할을 한다. 따라 서 본 연구에서는 isoproterenol과 melatonin의 적정농도 확인과 난포란의 quality가 낮은 3등급 난자의 체외발달율 개선효과 여부를 검토하고자 melatonin 10—7∼11—11 및 isoproterenol 10—10∼10—14몰 농도로 체외성숙 배양액에 첨가하고 난포란의 등급을 구분하여 단위발생을 유기하였다. 뿐만 아니라 체외 배양액에 첨가하여 등급이 낮은 돼지 난포란 유래 단위발생란의 분할율 및 배반포기 발달율을 조사하였다. 도축장으로부터 채집한 돼지 난소의 난포에서 난포란을 채취하여 난구세포층이 3∼5층 이상 충실하게 부착되어 있는 난포란을 Grade І(1∼2등급), 난구세포층이 1∼2층 이하 및 부분적으로 나화되어 있는 난포란을 Grade III(3∼4등급)으로 등급을 구분하여 전기자극법 으로 자극을 가한 다음, 2 mM의 6-DMAP 용액으로 2시간 동안 처리하여 단위발생을 유 도하였다. Isoproterenol(—10, —12, —14몰)과 melatonin(—7, —9, —11몰)을 체외성숙 및 체 외 배양시에 각각 병용첨가하였다. 체외성숙 배양액은 TCM-199 배양액을 기본배양액으 로 하여 각종 호르몬을 첨가하여 사용하였으며, 체외배양액은 PZM-5에 3 mg FAF-BSA 를 첨가하여 38.5℃, CO2 배양기에서 7일간 배양을 실시하였다. 체외 성숙 및 배양시에 melatonin 10—10몰 및 isoproterenol 10—12몰을 첨가하였을 때, 3등급 난자의 체외 성숙율 이 79.3%로서 1등급(82.6%) 난포란과 차이가 없을 정도로 개선되었으며, 배반포기로의 체외발달율은 melatonin 10—10몰 및 isoproterenol 10—12몰이 67.0%(1등급) 및 50.2%(3등 급)로서 1등급이 유의적(p<0.05)으로 높은 발달율을 보였으나, 다른 처리구에서는 1, 3등 급 간에 차이가 없었지만 개선되는 경향을 보였다. 이상의 결과로 볼 때, melatonin과 isoproterenol의 첨가농도는 melatonin 10—10몰 및 isoproterenol 10—12이 적정한 농도인 것으로 판단되며, 1, 3등급 간에 차이가 없음을 확인 하였다. 따라서 이들을 첨가하면 난포란의 활용도 제고에 크게 기여할 수 있을 것으로 생각된다. Key words)
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