영지버섯 배양물을 이용한 미용식품 개발에 관한 연구 = The study about exploiting cosmetic foods with Gunoderma Lucidum culture
저자
발행사항
충주 : 충주대학교 산업대학원, 2010
학위논문사항
학위논문(석사)-- 충주대학교 산업대학원: 식품생명공학전공 식품공학 전공 2010. 2
발행연도
2010
작성언어
한국어
발행국(도시)
충청북도
형태사항
x, 63 p. ; 26cm
일반주기명
지도교수:정재현
소장기관
본 연구는 약용버섯 중에서 생리활성이 우수한 영지버섯과 미용효과가 알려져 있는 어성초, 삼백초 및 신선초 박 등을 이용하여 고체기질로 만들어 발효시킨다면, 약리작용의 상승효과가 있을 것으로 기대하였다. 따라서 어성초, 삼백초 및 신선초 박을 고체기질로 하여 영지버섯균사를 접종하고, 최적생육조건을 조사하였으며, 한편 이들의 열수 추출물로부터 기능성을 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
1. 접종원으로 사용할 영지버섯균사의 최적 생육 조건을 검토하였다.
2. 신선초 박에, 어성초와 삼백초를 1:1로 혼합한 혼합물을 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 50%로 혼합한 후 영지버섯 균사체를 접종하여 배양한 결과 영지버섯 균사의 생육이 40% 첨가까지는 생육이 양호하였으나 그 이상 첨가하면 생육에 저해를 받았다. 따라서 신선초박 100에 대하여 어성초와 삼백초를 1:1로 혼합한 혼합물 40%를 첨가하여 영지버섯 균사체 배양물을 제조하고, 이를 HS 배양물이라하였다.
3. HS 배양물의 대량배양은, 영지버섯 종균을 최적의 생육조건에서 8일간 배양한 것을 종균으로 사용하였다. 또한 고체기질은 풍건한 신선초 박에 대하여 어성초 20%와 삼백초 20%를 첨가하고, 기질양에 대하여 1.5~2.0 배의 물을 가하여 6시간 팽윤시킨 후 종균을 접종하고 30℃에서 40일간 발효시켜 HS 배양물을 얻었다. 그리고, 기능성 확인을 위한 시료는 열수추출한 후 여과하여 여액을 동결건조하여 사용하였다.
4. 위의 최적 조건으로 제조한 HS배양물 유기산 성분 및 함량을 HPLC로 분석하였다.그 결과(Fig.) HS배양물 중에 lactic acid, oxalic acid, acetic acid, tartaric acid, citric acid, succinic acid, malic acid함량이 각각 2740, 900, 400, 300, 200, 65, 39 μg/ml 검출되었다.
5. 총페놀성 화합물 양은 100㎍/㎖에서 삼백초, 영지버섯 균사체, 어성초, 신선초, HS배양물이 각각 17, 15, 12, 12, 8㎍/㎖ 나타냈으며, 500㎍/㎖ 농도에서는 삼백초, 영지버섯 균사체, 어성초, HS배양물, 신선초가 각각 84, 77, 52, 45, 30㎍/㎖을 나타내었고, 1000㎍/㎖의 농도에서는 삼백초, 영지, 어성초, HS배양물, 신선초가 각각 156, 150, 100, 88, 72㎍/㎖을 나타내어 농도에 의존적으로 총 페놀화합물의 함량이 증가함을 알 수 있었다. 또한 삼백초에 많은 총페놀 함량을 볼 수 있었다.
6. DPPH Free redical 소거법에 의한 전자공여능에서는 100㎍/㎖ 농도에서 삼백초, HS배양물, 어성초 순으로 72.9, 68.5, 45.2%의 전자 공여능을 나타내었으며 500㎍/㎖ 농도에서는 HS배양물, 어성초, 삼백초 순으로 87.3, 85.6, 78.3%로 나타났고, 1000㎍/㎖ 농도에서는 HS배양물, 어성초 , 삼백초, 신선초, 영지버섯 균사체가 90.3, 87.3, 85.7, 57.1, 22.7%순으로 나타났다. 또한 500㎍/㎖ 농도에서 HS 배양물은 87.3%이고 BHA 및 catechin은 86.7, 87.1로 HS 배양물이 다소 높은 전자공여능을 나타냈으며, BHT의 87.9%보다는 낮은 수준의 전자공여능을 나타내었다. 1000㎍/㎖ 농도에서 HS배양물이 90.3%로 나타나 BHA, BHT, catechin의 87.8, 87.9 및 87.3% 보다 높은 전자공여능을 보였다. 따라서 HS 배양물은 500과1000㎍/㎖ 농도에서 BHA 및 catechin보다 높은 전자공여능을 나타내었다.
7. SOD유사활성은 100㎍/㎖농도에서 HS배양물과 삼백초가 11.5%, 10.27% 로 BHA, catechin, ascorbic acid의 6.45, 7.76, 2.38% 보다 월등히 높은 SOD 유사활성을 나타내었다. 500㎍/㎖농도에서는 신선초, 삼백초, HS배양물 순으로 19.80, 11.44, 10.45% 순으로 나타났으며 이는 catechin, BHA의 5.07, 4.86% 보다 높은 SOD 유사활성을 나타내었다. 1000㎍/㎖의 농도에서는 신선초, 영지버섯 균사체, HS 배양물, 삼백초가 13.33, 11.23, 8.66, 6.37%의 순으로 SOD 유사활성을 나타내었다. 따 라서 100 및 500㎍/㎖ 농도에서 HS배양물은 BHA나 catechin 보다 높은 SOD유사활성을 나타내었다.
8. Tyrosinase 저해 활성은 100㎍/㎖ 농도에서 삼백초, 신선초, HS 배양물, 어성초, 영지버섯 균사체가 15.55, 12.13, 6.75, 6.43, 3.89%로 나타나 BHA 및 catechin의 7.01, 5.86보다 삼백초와 신선초가 tyrosinase 저해활성이 높게 나타났고 HS 배양물은 6.75%로 catechin의 5.86% 보다 높은 tyrosinase 저해활성을 보였다. 500㎍/㎖ 농도에서는 삼백초, 신선초, 영지S 배양물은 6. 배양물이 20.07, 12.75, 8.88, 8.79, 3.38% 순으로 나타나 HS 배양물을 제외한 삼백초, 신선초, 영지버섯 균사체 및 어성초가 BHA의 6.48% 보다 tyrosinase 저해활성이 높게 나타났다.
9. 항균효과는 HS 배양물을 균주의 최적 생육배지 5mL에 각각 0, 25, 50, 75, 100% 농도로 첨가하여 MIC를 측정한 결과 Salmonella typhimurium과 Pseudomonas aeruginosa 모두 배양 10시간 까지는 균체수가 증식 하였으나, 10시간 이후부터는 HS 배양물 75, 100% 농도에서 균의 생육이 저지 되었다.
10. 면역 활성 결과 비장을 시료와 배양하여 mitogen 활성을 측정한 결과, 대조군과 비교한 Lipopilysaccharide(LPS, endotoxin)는 2.4배를 나타내었으며 대조군에 비하여 HS 배양물은 2배의 높은 면역 활성을 나타내었다.
Taking out Gunoderma Lucidum with high physiological activity, Houttuynia Cordata, Saururus Chinesis bail and dross of Angelica Keiskei which have cosmetic effects in several kind of medicinal fungi,make them into solid medium and fermented.The synergistic effects of pharmacological of it is expect.So Houttuynia Cordata,Saururus Chinesis bail and Angelia Keiskei act as soild medium to vaccinate Gunoderma Lumcidum hypha,make sure that the situation of it is suitable for giving birth,farther,get the next results from studying the function of extract from the warm water.
1. Study the most suitable situation for giving birth of Gunoderma Lucidum which act as inoculum.
2. Take the mixture of Houttuynia Cordata and saururus Chinesis bail 1 to 1 mix with the dross of Angelica Keiskei,the concentration is 5% 10% 15% 20% 25% 30% 35% 40% 45% 50%,then vaccinate the Gunoderma Lucidum hypha and culture it,the best fertility is at the time when the concentration is 40%, or will impede fertility.So add 40% Houttuynia Cordata and Saururus Chinesis bail 1 to 1 mixture to 100% dross of Angelica Keiskei and make it be the culture of Ganoderma Lucidum hypha,this is called HS culture.
3. Culture Gunoderma Lucidum in the most suitable situation for 8days,and the solid medium is dry dross of Angelica Keiskei add 20% Houttuynia Cordata,20% Saururus Chinesis bail and water 1.5 to 2 times of matrix,swelling for 6 hours,getting HS culture after 40 days in 30 degrees at last.To make sure its function,filter the culture with hot water then it can be used after freezing and dry.
4. Production of HS culture test material, Use HPLC to analys the Composition and content of the HS culture test material, Measured the Organic acid contents are lactic acid, oxalic acid, acetic acid, tartaric acid, citric acid, succinic acid, malic acid 2740, 900, 400, 300, 200, 65, 39 μg/ml.
5. Total Folin-Denis compound volume means that Saururus Chinesis bail,Gunoderma Lucidum hypha,Houttuynia Cordata,Angelica Keiskei,HS culture,in proper order show 17, 15, 12, 12.8μg/ml when concentration is 100μg/ml.Saururus Chinesis bail,Gunoderma Lucidum hypha,Houttuynia Cordata,Angelica Keiskei,HS culture in proper order show 84, 77, 52, 45, 30μg/ml when concentration is 500μg/ml.Saururus Chinesis,Gunoderma Lucidum,Houttuynia Cordata,HS culture,Angelica Keiskei in proper order show 156,150,100,88,72μg/ml when concentration is 1000μg/ml,farther the fact that there is much Folin-Denis in Saururus can be found.
6. It is measured by DPPH Free redical method the electron donating ability of Saururus Chinesis bail, HS culture,Houttuynia Cordata in proper order is 72.9,68.5,45.2% when concentration is 100μg/ml,the electron donating ability of HS culture,Houttuynia Cordata,Saururus Chinesis bail in proper order is 87.3, 85.6, 78.3% when concentration is 500μg/ml,the electron donating ability of HS culture,Houttuynia Cordata,Saururus Chinesis bail,Angelica Keiskei,Gunoderma Lucidum in proper order is 90.3, 87.3, 85.7, 57.1, 22.7%,besides the electron donating ability of HS culture 87.3%,BHA and carechin 86.7,87.1 HS culture when concentration is 500μg/ml is higher than BHA and catechin,but lower than BHT 87.9%.HS culture 90.3% gets more when concentration is 1000μg/ml than BHA,BHT,catechin 87.8,87.9,87.3,So HS culture has higher the electron donating ability than BHA and catechin when concentration is 1000μg/ml.
7. About SOD similar activity,HS culture and Saururus Chinesis bail in proper order is 11.55,10.27% when concentration is 100μg/ml,more activated than BHA catechin,ascorbic acid 6.45%,7.76%,2.38%,the activity of Angelica Keiskei,Saururus Chinesis bail inesis bail is 19.8%,11.44%,10.45% when concentration is 500μg/ml,higher than catechin,BHA,5.07,4.86%SOD activity.The aceivity of Angelica Keiskei,Gunoderma Lucidum hypha,HS culture,Saururus Chinesis bail in proper order is 13.33,11.23,8.66,6.37%,so the activity of HS culture is higher than BHA and catechin SOD when concentration is 100 and 500μg/ml.
8. About abstructive activity,Angelica Keiskei,HS culture,Saururus Chinesis bail,Gunoderma Lucidum hypha in proper order show 12.13, 10.56, 9.08, 3.89% when concentration is 100μg/ml,the Tyrosinase abstructive activity is higher than BHA and catechin 7.01,5.86%,Angelica Keiskei and HS culture,the Tyrosinase abstructive activity of Saururus Chinesis bail,Angelica Keiskei,Gunoderma Houttuynia Cordata,HS culture in proper order is 20.07,12.75,8.88,8.79,3.38% when concentration is 500μg/ml.
9. About immunocompetence Results. Spleen test results and mitogen activity test, Lipopilysaccharide(LPS,endotoxin) is 2.4 times stronger than the immune activity of the control group, the immune activity of HS culture is 2 times stronger than the control group.
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