투석 방법이 ErmSF 단백질 재활성화의 수율과 효소활성에 미치는 영향 = Effect of Dialysis Methode on Yield and Activity in ErmSF Refolding
저자
秦炯淙 (水原大學校 自然科學大學 遺傳工學科, 生化學, 分子生物學, 蛋白質工學)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2003
작성언어
Korean
KDC
104.000
자료형태
학술저널
수록면
175-185(11쪽)
제공처
ErmSF is one of the four gene products produced by Streptomyces fradiae to be resistant to autogenous antibiotic, tylosin. This protein catalyzes the methylation reaction of a single adenine residue (A2058) of 23S rRNA to produce dimethyl adenine from monomethyl adenine or unmodified adenine. This chemical modification reduces the affinity of MLS (macrolide -lincosamide -streptogramin B) antibiotics to peptidyltransferase circle to confer the resistance to these antibiotics on the microorganisms. This target site modification is predominantly adopted by the bacteria, which are resistant to MLS antibiotics. The ermSF was cloned from Streptomyces fradiae NRRL2702, ligated into pET23b equipped with T7 promoter and transformed into E. coli BL21(DE3). The transformed E. coli exhibited the resistance to erythromycin, but most of the expressed protein existed asan inclusion body, insoluble aggregate. The overexpressed inclusion body was extracted, solubilized with 6M guanidine-HCl, and purified by metal ion (Ni^(2+)) affinity chromatography to obtain 171mg of denatured protein per liter of culture. Renaturationof protein was performed by step-wise removal of guanidine-HCl. Most of the refolded protein appeared to assume the natural conformation, as judged by circular dichroism spectroscopy measurement. While the lower concentration of the protein in renaturation medium gave the more amount of refolded protein, the activity of the renatured protein had a tendency to increase as more protein was added in the renaturation medium. The highest yield of the renatured protein, 107 mg/ liter of culture was attained with 55% activity relative to naturally folded protein. Furthermore, refolding of the denatured ErmSF was carried out by two step removal of denaturant. In this case, while the yield of the refolded protein was decreased but the activity increased compared to the typical refolding experiment, the yields and activities from the experiments were almost similar regardless of the concentration of denaturant in the medium, suggesting that the renaturation of ErmSF under the condition employed occurred spontaneously with a strong tendency to fold to native state, even though it is composed of two domains.
서지정보 내보내기(Export)
닫기소장기관 정보
닫기권호소장정보
닫기오류접수
닫기오류 접수 확인
닫기음성서비스 신청
닫기음성서비스 신청 확인
닫기이용약관
닫기학술연구정보서비스 이용약관 (2017년 1월 1일 ~ 현재 적용)
학술연구정보서비스(이하 RISS)는 정보주체의 자유와 권리 보호를 위해 「개인정보 보호법」 및 관계 법령이 정한 바를 준수하여, 적법하게 개인정보를 처리하고 안전하게 관리하고 있습니다. 이에 「개인정보 보호법」 제30조에 따라 정보주체에게 개인정보 처리에 관한 절차 및 기준을 안내하고, 이와 관련한 고충을 신속하고 원활하게 처리할 수 있도록 하기 위하여 다음과 같이 개인정보 처리방침을 수립·공개합니다.
주요 개인정보 처리 표시(라벨링)
목 차
3년
또는 회원탈퇴시까지5년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한3년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한2년
이상(개인정보보호위원회 : 개인정보의 안전성 확보조치 기준)개인정보파일의 명칭 | 운영근거 / 처리목적 | 개인정보파일에 기록되는 개인정보의 항목 | 보유기간 | |
---|---|---|---|---|
학술연구정보서비스 이용자 가입정보 파일 | 한국교육학술정보원법 | 필수 | ID, 비밀번호, 성명, 생년월일, 신분(직업구분), 이메일, 소속분야, 웹진메일 수신동의 여부 | 3년 또는 탈퇴시 |
선택 | 소속기관명, 소속도서관명, 학과/부서명, 학번/직원번호, 휴대전화, 주소 |
구분 | 담당자 | 연락처 |
---|---|---|
KERIS 개인정보 보호책임자 | 정보보호본부 김태우 | - 이메일 : lsy@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0439 - 팩스번호 : 053-714-0195 |
KERIS 개인정보 보호담당자 | 개인정보보호부 이상엽 | |
RISS 개인정보 보호책임자 | 대학학술본부 장금연 | - 이메일 : giltizen@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0149 - 팩스번호 : 053-714-0194 |
RISS 개인정보 보호담당자 | 학술진흥부 길원진 |
자동로그아웃 안내
닫기인증오류 안내
닫기귀하께서는 휴면계정 전환 후 1년동안 회원정보 수집 및 이용에 대한
재동의를 하지 않으신 관계로 개인정보가 삭제되었습니다.
(참조 : RISS 이용약관 및 개인정보처리방침)
신규회원으로 가입하여 이용 부탁 드리며, 추가 문의는 고객센터로 연락 바랍니다.
- 기존 아이디 재사용 불가
휴면계정 안내
RISS는 [표준개인정보 보호지침]에 따라 2년을 주기로 개인정보 수집·이용에 관하여 (재)동의를 받고 있으며, (재)동의를 하지 않을 경우, 휴면계정으로 전환됩니다.
(※ 휴면계정은 원문이용 및 복사/대출 서비스를 이용할 수 없습니다.)
휴면계정으로 전환된 후 1년간 회원정보 수집·이용에 대한 재동의를 하지 않을 경우, RISS에서 자동탈퇴 및 개인정보가 삭제처리 됩니다.
고객센터 1599-3122
ARS번호+1번(회원가입 및 정보수정)