중합효소연쇄반응을 이용한 Mycoplasma pneumoniae의 검출 = Detection of Mycoplasma Pneumoniae in Clinical Samples by Polymerase Chain Reaction (PCR)
배경:Mycoplasma 폐렴의 진단법으로 사용되는 혈청학적 검사법과 배양검사법은 몇가지 제한이 있어 신속성과 정확성을 충족하지 못한다. 이를 보완한 중합효소연쇄반응법은 그 민감도와 특이도가 뛰어난 것으로 알려져 있어, 중합효소연쇄반응법을 이용한 M.pneumoniae DNA 검출이 실제 임상에서 신속하고 정확한 검사법으로 유용한 지를 알아보았다.
방법:1995년 5월부터 9월까지 영남대학교 의과 대학 부속병원 소아과에 폐렴으로 입원한 환아 중 mycoplasma 폐렴이 의심되는 17명의 환아를 대상으로 급성기와 회복기의 혈청을 이용한 mycoplasma 특이 항체 검사와 급성기의 가검물을 이용한 PCR을 실시하였다. 환아의 가검물로는 가래, 늑막강 삼출물 및 비인두강내 분비물을 이용하였다.
결과:Mycoplasma 특이 항체 역가가 음성인 경우에는 PCR에서도 전부 음성으로 나와서
100% (4예의 일치를 보였으나, mycoplasma 특이 항체 역가와 PCR 결과가 동시에 양성으로 나타난 경우는 85%(11예)였다. 그러나 Mycoplasma 특이 항체 역가는 의미있었으나 (각각 1:1,280, 1:2,560) PCR에서는 음성으로 나온 경우가 2예 있었는데, 이들은 각각 결핵과 전염성 단핵구증으로 확인되어 그 특이도와 민감도는 mycoplasma 특이 항체 검사법 보다 뛰어난 것으로 생각된다.
결론:PCR을 이용한 M. pneumoniae DNA의 검출은 높은 민감도와 특이도를 가지므로, 현재 흔히 사용하는 혈청학적 검사와 배양검사의 문제점을 보완한 확진법으로 임상에서 유용하게 사용될 수 있을 것으로 생각된다.
Background: Since culturing Mycoplasma pneumoniae(M. pneumoniae) is time-consuming and laborious, serological tests are widely used for the diagnosis. However, it takes time for a sufficient titer accumulation to take place for the serological tests to work. In addition, the accuracy of the serological tests is questionable since it is often difficult to distinguish current infection from the prior ones. Thus, we investigated the efficacy of PCR which amplified M. pneumoniae DNA as an alternative diagnostic test with greater accuracy and convenience.
Methods: For seventeen patients with possible mycoplasma pneumonia, who came to the department of Pediatrics, Yeungnam University Hospital between May and September of 1995, serological tests and PCR are simutaneously carried out. Sputum, pleural effusion and nasal secretion are collected from the patients for PCR with two sets of primers from P1 attachment-protein gene of M. pneumoniae.
Results: Of total 17 patients, 11 patients were PCR positive, and 6 patients are PCR negative. All of 11 PCR-positive patients showed high titers (1:320-1:5,120) of anti-mycoplasma antibody test. Two out of 6 PCR-negative patients had positive results in anti-mycoplasma antibody test. which were 1:1,280 and 1:2,560, respectively. Further workups for these patients revealed tuberculosis and infective mononeucleosis, respectively. The results of the first PCR test are identical to that of the second PCR test with a different primer.
Conclusion: Compared to the serological tests, PCR is more sensitive and accurate in diagnosing mycoplasma pneumonia. Further research is warranted to facilitate the method of clinical sample collection as well as to determine the optimal timing for the sample collection.
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