KCI등재
SCOPUS
BSA, Glucose및 Phosphate가 1세포기 생쥐수정란의 체외배양시 2-cell block과 배 발달에 미치는 영향 = Effects of BSA, glucose and phosphate on 2-cell block and blastocyst development of 1-cell mouse embryos during in vitro culture
저자
이정재 (고려대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 이용호 (고려대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 김탁 (고려대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 김선행 (고려대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 안일중 (고려대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 장기훈 (고려대학교 의과대학 산부인과학교실)
발행기관
학술지명
Obstetrics & Gynecology Science(Obstetrics & Gynecology Science)
권호사항
발행연도
2000
작성언어
Korean
KDC
516
등재정보
KCI등재,SCOPUS,ESCI
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
2274-2282(9쪽)
제공처
목적 : 여러 종의 포유류에서 수정란의 체외 배양시 특정 단계에서 발생 정지 (in vitro culture block)현상이 보고되면서, 이러한 현상에 관한 연구는 배양액의 기본 성분인 glucose 및 phosphate, 그리고 BSA의 농도가 배 및 배반포 발달에 영향이 있을 것으로 제기되었으며, 이를 알아보고자 실험을 계획하였다.
연구방법 : 기본 배양액으로 M16을 사용하여, 2-세포기 발달 정지 현상이 나타나는 ICR생쥐 1-세포기 수정난을 채취하여 배양하였다. 수정란의 체외배양은 첫 48시간 동안 다른 농도의 BSA (0-15%)하에서 이루어졌고, 48시간 이후 72시간 동안의 배양은 첫 48시간의 BSA 농도와 같은 농도를 사용한 군과 0.3%로 고정된 BSA를 사용한 군으로 나누어 이루어졌으며 각각 2 cell block의 극복율과 배발달율을 확인하였다. 또한 glucose와 phosphate의 효과를 확인하기 위해 배양액에서 첫 48시간 동안은 제거하였으며 48시간 이후 72시간 동안은 제거한 군과 첨가한 군으로 나누어 실험하였다.
결과 : 1. 1-세포기 생쥐 수정란의 배양시 첫 48시간 동안 BSA 농도가 증가할수록 2 cell block의 극복율이 증가함을 알 수 있었지만, 48시간 이후의 배양액에서는 BSA 농도가 증가하여도 배발달율에는 영향을 미치지 못하였다. 2. 초기 배양액에서 glucose 및 phosphate를 각각 혹은 동시에 제거한 경우 BSA의 농도가 높아질수록 2 cell block의 극복율과 배반포율도 증가하지만 후기 배양액(48시간 이후)에서 glucose와 phosphate의 조성의 변화는 배반포율에 영향을 미치지 못하였다. 또한, 배양액의 BSA 농도가 증가할수록 glucose 및 phosphate를 제거한 후 발생하는 2 cell block의 극복율과 배반포율은 증가하였다.
결론 : 이상의 결과는 1세포기 생쥐 수정란의 체외 배양시 발생하는 2세포기 정지현상의 극복하고 지속적인 배발달을 유지하기 위해 BSA의 농도를 증가시키고, 특히 초기배양에서 glucose 및 phosphate를 제거하는 것이 바람직한 배양 방법으로 생각된다.
Objective : To assess the effect of BSA, glucose and phosphate addition to a chemically defined medium (M16) on the development of mouse one-cell embryos in vitro.
Method : Harvested mouse (ICR) one-cell embryos were cultured for 48 hours using M16 solution with various concentrations (0-15%) of BSA. First, mouse 1-cell embryos were divided into two groups. One group of them was cultured under the same condition for further 72 hours and the other group was cultured in the media with fixed concentration (0.3 %) of BSA, and evaluated the effect of the media on the 2-cell block and further embryonal development. Secondly, the effects of removal of glucose and/or phosphate from the BSA conditioned culture media (M16) on the development of mouse embryo were also evaluated.
Results : Higher concentrations (0.9-1.5 %) of BSA in the culture media during the first 48 hours of 1-cell mouse embryo culture overcome 2-cell block significantly, however, the continued exposure to higher concentrations after 48 hours do not influence further development. Removal of glucose and/or phosphate from the culture media during the early stage (first 48 hours) of culture showed significant overcoming of 2-cell block and increased the blastulation rate, but after the first 48 hours of culture, the absence or presence of glucose and/or phosphate do not influence the further embryonal development.Finally, the positive effects of the removal of glucose and/or phosphate are also augmented with the increased BSA concentration of the culture media.
Conclusion : Increased BSA concentration and removal of glucose and/or phosphate during the early stage of culture may have favorable effect on 2-cell block and further development of mouse embryo in vitro.
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