KCI등재
SCOPUS
체외수정 배양액의 단백질원으로서 인간 난포액 및 합성 혈청 대용제가 인간 난자의 수정 및 초기 배아 발달에 미치는 효과 = Effect of Human Follicular Fluid and Synthetic Serum Substitute as a Protein Supplement for In Vitro Fertilization Culture Medium on Human Oocyte Fertilization and Early Embryonic Development
저자
이규섭 (부산대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 김연주 (부산대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 양승홍 (부산대학교 의과대학 산부인과학교실)
발행기관
학술지명
Obstetrics & Gynecology Science(Obstetrics & Gynecology Science)
권호사항
발행연도
1998
작성언어
Korean
KDC
516
등재정보
KCI등재,SCOPUS,ESCI
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
1662-1670(9쪽)
제공처
소장기관
본 연구는 인간 난자의 체외수정에 있어서 단백질원으로 널리 이용되고 있는 태아 제대 혈청의 대체물질로서 인간 난포액 및 합성 혈청 대용제의 적합성을 확인하기 위하여 체외수정 배양액에 단백질원으로 인간 난포액과 합성 혈청 대용제의 첨가가 인간 난자의 체외수정, 초기 배아 발달, 임신율 및 임신 유지에 미치는 각각의 영향을 비교 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
1. 난포액군, 합성 혈청군 및 제대 혈청군의 수정률은 71.7%, 57.9% 및 67.0%로서 난포액군과 합성 혈청군, 제대 혈청군과 합성 혈청군 사이에서 유의한 차이가 있었고(P<0.05), 난할률은 난포액군 및 합성 혈청군은 각각 91.9% 및 88.4%로 제대 혈청군의 82.3%에 비하여 다소 높았으나 단백질원에 따른 유의한 차이는 없었다(P> 0.05).
2. 배아의 할구수에 미치는 영향은 단백질원에 따른 유의한 차이는 없었으나(P>0.05), 제3난할 이상을 수행 한 배아의 비율을 비교한 결과 난포액군은 72.6%, 합성 혈청군은 62.8%, 그리고 제대 혈청군은 68.3%로 난포액 군에서 다소 높은 경향을 나타내었다.
3. 배아등급에 미치는 영향에서 최상의 배아, 즉 등급 1 배아의 비율은 난포액군 및 합성 혈청군은 각각 45.6% 및 51.2%로 제대 혈청군의 60.6%에 비하여 낮았으며, 특히 제대 혈청군은 난포액군에 비하여 등급 1 배 아의 비율이 유의하게 높았다(P<0.05).
4. 난포액군, 합성 혈청군, 및 제대 혈청군에서 임상적 임신율은 각각 30.0%, 23.5% 및 32.8%이며, 특히 제대 혈청군은 합성 혈청군에 비하여 유의한 향상을 보였고(P<0.05), 임상적 임신이 성립된 후 임신유지율에는 단백질원에 따른 유의한 차이는 없었다(P>0.05).
5. 난관 요인의 불임증에서는 인간 난포액, 합성 혈청 대용제 및 태아 제대 혈청을 사용할 때 임상적 임신율 은 각각 28.6%, 28.6% 및 41.0%로 특히 제대 혈청군에 서 난포액군 및 합성 혈청군에 비하여 유의한 향상이 있었으며(P<0.05), 원인불명의 불임증에서는 인간 난포 액의 첨가시 40.0%로 이는 합성 혈청군의 12.5% 및 제대 혈청군의 18.2%에 비하여 유의하게 임상적 임신율의 향상이 있었다(P<0.05).
결론적으로 인간 난포액은 원인불명의 불임증에서도 높은 임상적 임신율을 나타내었으나 합성 혈청 대용제는 오히려 인간 난자의 수정률 저하 및 수정란의 발생 억제를 초래하여, 인간 난자의 체외수정에 있어서 단백 질원으로 인간 난포액이 태아 제대 혈청의 우수한 대체 물질로 사료된다.
In an effort to improve the in vitro culture conditions of human gametes and embryos in our laboratory, this study was performed to evaluate the efficacy of human follicular fluid and synthetic serum substitute as protein supplement for in vitro fertilization culture medium on human oocyte fertilization and early embryonic development. We retrospectively analyzed IVF cycles performed at Pusan National University Hospital between June 1995 and May 1997. Of these, 142 IVF cycles were reviewed and classified according to the nature of protein supplement used in the embryo culture medium. Three protein supplements utilized during this time period were compared: human follicular fluid (HFF), synthetic serum substitute(SSS; 99193, Irvine Scientific) and fetal cord serum (FCS). Patients in male or ovulatory factor infertility were eliminated. Oocytes were retrieved transvaginally from patients treated with pituitary suppression with GnRH-agonist and ovarian stimulation with follicle stimulating hormone and human menopausal gonadotropin. For insemination and sperm preparation, modified Ham`s F-10 culture medium (9461, Irvine Scientific) was supplemented with either 10% HFF, 10% SSS or 10% FCS. Fertilization was evaluated 18 hours after insemination. For embryo culture, the same culture medium supplemented, with either 20% HFF, 15% SSS or 15% FCS was prepared. Embryo transfer was perfor.med on Day 3 (72 hour postinsemination). Clinical pregnancy was confirmed by the presence of a heartbeat on ultrasound 4∼6 weeks after embryo transfer.
The results were as follows:
1. Overall oocyte fertilization was lower when SSS was used as an insemination medium supplementation compared to other protein supplements [57.9% SSS (P<0.05) vs 71.7% and 67.0%, respectively, with HFF and FCS].
2. The proportion of cleaved embryos was higher (91.9%) in the HFF-supplemented culture medium than other protein supplements [88.4% and 82.3%, respectively, with SSS and FCS]. However, these results were not statistically different among the three protein supplements.
3. The proportion of at least 3 mitotic divisions before embryo transfer was not significantly different among the three protein supplements.
4. The incidence of conceptuses without cytoplasmic fragments (grade 1 embryos) was higher in the FCS- upplemented culture medium than other protein supplements [60.6% FCS vs 45.6% HFF (P<0.05) and 51.2% SSS].
5. There was a higher pregnancy rate with FCS-supplemented culture medium than with other protein supplements [32.8% FCS vs 23.5% SSS (P<0.05) and 30.0% HFF]. The ongoing pregnancy rate, including the babies that were delivered, was not statistically different among three protein supplements.
6. The clinical pregnancy rate was significantly higher for tubal infertility using the FCS supplement (41.0%; P<0.05) and for unexplained infertility with the HFF supplement (40.0%; P<0.05).
In conclusion, these results suggest that using HFF as a protein supplement was as useful and as effective as FCS. In addition, the results indicate that SSS was not effective agent in mproving pregnancy rates.
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