인체 자궁암 세포주에서 항암제와 항산화제에 의한 apoptosis 유도와 p53 발현의 변화 = Apoptosis induction and p53 expression by anticancer agents with antioxidants in human cervical
저자
발행사항
청주 : 淸州大學校 大學院, 2004
학위논문사항
학위논문(석사)-- 청주대학교 대학원: 유전공학과 2004. 2
발행연도
2004
작성언어
한국어
주제어
KDC
570.65 판사항(4)
발행국(도시)
충청북도
형태사항
iii, 56p. : 삽도 ; 27cm .
일반주기명
참고문헌: p. 46-54
소장기관
자궁암은 아시아 여자에서 가장 빈번하게 발생되면 사망의 주된 원인이 된다. 또한 주로 바이러스성 병변을 가지고 있으며 oncogene이 될 가능성이 있는 HPV는 자궁경부, 외음부, 음경등의 병변을 수반하여 암으로 발전한다.
종양을 유발할 수 있는 것은 돌연변이 p53이며, p53의 변이 유무에 따라 apoptosis가 조절된다. p53은 DNA 손상에 반응하여 apoptosis를 유발하는 tumor suppressor protein으로서 세포주기조절과 apoptosis를 조절하는 중요한 역할을 한다. 세포내 손상에 의해 과발현된 p53은 다시 caspase를 통해 apoptosis를 유도하기도 하고 p53 target gene을 조절하여 apoptosis를 유도하는 일련의 과정이 진행된다.
Apoptosis의 p53 의존적 경로가 밝혀지면서 p53 단백질 발현과 apoptosis는 여러 종양에서 상호연관성이 깊은 것으로 연구되었지만 p53 비의존적 경로를 통해서도 apoptosis가 일어날 수 있다. 자궁경부암에서도 항암요법 전후에 종양조직의 apoptosis와 p53발현도를 조사해보면 p53발현과 apoptosis가 밀접한 연관성이 있으며 항암요법제의 세포독성효과는 p53을 매개로하는 apoptosis를 활성화시킨다.
본 연구는 인체 자궁암 세포주에서 항암제와 항산화제를 처리한 후 apoptosis 유도와 p53발현정도를 조사하여 비교 관찰하고 p53발현을 조절하는 요인을 밝힘으로서 암치료에 새로운 지표를 제공하고자한다.
Apoptosis의 양상은 Tryphan blue excision을 통한 cell viability와 DNA fragmentation을 통해 분석하고 전자현미경에 의한 apoptotic body로 확인함으로서 apoptosis 유도를 증명하였다. 자궁암 세포주인 HeLa cell은 항암제인 cisplatin, 5-Fluorouracil, taxol에 의해 apoptosis가 유도 됨으로서 서로 밀접한 관계가 있는 것으로 보인다. 그러나 taxol은 p53발현을 유도하지 않기 때문에 다른 apoptotic pathway를 통해 apoptosis가 일어난다고 예상할 수 있다. Cisplatin, 5-Fluorouracil은 농도에 따라 p53의 발현을 증가시킨다. 또한 항산화제인 vitamin C와 curcumin, β-carotene은 항암제에 의해 유도된 apoptosis와 p53 발현을 증가시키는 것으로 보아 항암제 사용시 함께 음식으로 섭취하거나 복용하는 것이 암치료에 좋은 효과를 나타낼 것으로 기대된다. 항암제와 항산화제에 의해 apoptosis가 유도되고 p53 유전자를 강하게 발현시키는 요인을 찾아내는 것은 효과적인 자궁암치료 및 예방에 새로운 가능성을 시사하는 것이다.
Cervical cancer has frequently broken out among Asian women and become a major cause of death. Also it has viral disease mostly and has a possibility of be oncogene. Investigating apoptosis and expression level of p53 before or after anticancer therapy in case of Cervical cancer, it is found that expression of p53 has a close relation to apoptosis and cytotoxicity of anticancer therapy active apoptosis mediated p53.
In this study, we each treated with anticancer drugs Taxol, 5-fluorouracil and Cisplatin in HeLa of human cervical cancer cell line. We observed apoptosis induction and p53 expression level in combination Vitamin C, Curcumin, β-carotene as antioxidant agents with anticancer drugs. We evidenced apoptosis in observation of DNA fragmentation assay and inverted microscope cell morphology. We observed expression of p53 with western blotting analysis to prove interaction of apoptosis induction and Expression level of p53 protein. Apoptosis have a close relation to expression of p53 because anticancer drugs 5-fluorouracil and cisplatin induce apoptosis in HeLa of human cervical cancer cell line, but Taxol do not. Curcumin, Vitamin C and β-caroten increased and expression of p53 by anticancer drugs. Finding factors that have an effect on induce and inhibition of cervical cancer by relating expression of p53 to apoptosis induction will be able to furnish new information for prevention and cure of cervical cancer.
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