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Transcriptionally active TFIIH of the early-diverged eukaryote <i>Trypanosoma brucei</i> harbors two novel core subunits but not a cyclin-activating kinase complex
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2009
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SCOPUS,SCIE
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학술저널
수록면
3811-3820(10쪽)
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<P><I>Trypanosoma brucei</I> is a member of the early-diverged, protistan family Trypanosomatidae and a lethal parasite causing African Sleeping Sickness in humans. Recent studies revealed that <I>T. brucei</I> harbors extremely divergent orthologues of the general transcription factors TBP, TFIIA, TFIIB and TFIIH and showed that these factors are essential for initiating RNA polymerase II-mediated synthesis of spliced leader (SL) RNA, a <I>trans</I> splicing substrate and key molecule in trypanosome mRNA maturation. In yeast and metazoans, TFIIH is composed of a core of seven conserved subunits and the ternary cyclin-activating kinase (CAK) complex. Conversely, only four TFIIH subunits have been identified in <I>T. brucei</I>. Here, we characterize the first protistan TFIIH which was purified in its transcriptionally active form from <I>T. brucei</I> extracts. The complex consisted of all seven core subunits but lacked the CAK sub-complex; instead it contained two trypanosomatid-specific subunits, which were indispensable for parasite viability and SL RNA gene transcription. These findings were corroborated by comparing the molecular structures of trypanosome and human TFIIH. While the ring-shaped core domain was surprisingly congruent between the two structures, trypanosome TFIIH lacked the knob-like CAK moiety and exhibited extra densities on either side of the ring, presumably due to the specific subunits.</P>
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