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녹색 형광단백 유전자를 함유한 아데노바이러스 주입시 마우스 생체내 발현양상 = Expression patterns of green fluorescent protein ( GFP ) after the intravenous injection with adenovirus vector in mouse organs
저자
진종률(Jong Youl Jin) ; 송치원(Chi Won Song) ; 김진아(Jea Na Kim) ; 이희진(Hee Jin Lee) ; 김태규(Tai Gyu Kim) ; 한치화(Chi Wha Han) ; 엄현석(Hyun Seok Eom) ; 박수정(Soo Jeong Park) ; 정대철(Dae Chul Jeong) ; 정낙균(Nak Gyun Chung) ; 김소연(Soh Yeon Kim) ; 서영훈(Young Hoon Seo)
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학술지명
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발행연도
2001
작성언어
-주제어
KDC
500
등재정보
KCI등재후보
자료형태
학술저널
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수록면
537-545(9쪽)
제공처
Background : The green fluorescent protein (GFP) from jelly fish, A equorea victoria, has become a versatile reporter for monitoring gene expression in a variety of cells and organisms . Using GFP as a marker protein we studied whether there are any differencies in the expression patterns among organs in mouse after intravenous injection of adenovirus vectors with GFP gene. Methods : Recombinant E1, E3- defective type 5 adenovirus vectors (2×10(8)/mouse) with CMV promoter and GFP gene were injected into mice via tail vein. On 3, 6, 9, 14, 21, 28 days after gene transfer, 5 mice per experiment s were sacrificed by cervical dislocation and obtained liver , lung, heart , kidney, spleen, small intestine and bone. Half of them were examined by optical microscope after H-E stain. Another half were examined by fluorescent microscope after frozen section. Western blotting were done for each samples with anti- GFP monoclonal antibody and obtained GFP bands were quantitatively compared using Gel-Doc (Bio- Rad, USA) image analyzer. Results : In all organs that we obtained, expression of GFPs are noticed 3 days after gene transfer and reached a maximum around 9th to 14th days, after then the intensities are slightly decreased but maintained until 28th days as determined by Western blotting. On fluorescent microscopic examination, GFPs are well and most frequently expressed on lung among all the examined organs. There are little expression of GFPs on liver parenchymal area around the sinusoids and central veins, although patchy expression of GFPs are observed along the liver capsules. GFPs are highly expressed around the splenic trabecula area but splenic pulp area, it is very spar sely expressed. GFPs are more frequently and highly expressed around the renal tubular area than gromerular area in kidneys. In small intestine, GFPs are expressed on mid portion of microvilli. GFPs are not expressed on myocardium except scanty expression on endocardium. Bone marrow showed GFPs but precise localization is difficult because bony spicules mashed bone marrow during the preparation of frozen section. No specific pathologic lesions possibly related with adenovirus administration are observed on microscopic examination of H-E stained specimens. Conclusions: GFPs can be detected in cells without the fixing and staining and a good marker to studying the kinetics and persistence of adenovirus mediated gene therapy. And there are different GFP expression patterns according to the organs after intravenous injection of adenovirus vectors with GFP gene in mouse.(Korean J Med 61:537- 545, 2001)
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