SCOPUS
KCI등재
SCIE
GH_3 세포(rat somatomammotropic tumor cell)에서 TRH가 Phospholipase D 활성에 미치는 효과 = Effect of TRH on Phospholipase D Activity in GH_3 Cell
저자
김동선 (한양대학교 의과대학 내과학교실) ; 김태화 (한양대학교 의과대학 내과학교실) ; 이창범 (한양대학교 의과대학 내과학교실) ; 안유헌 (한양대학교 의과대학 내과학교실) ; 윤미섭 (한양대학교 의과대학 생화학교실) ; 한중수 (한양대학교 의과대학 생화학교실)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2002
작성언어
Korean
주제어
KDC
511.000
등재정보
SCOPUS,KCI등재,SCIE
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
465-472(8쪽)
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연구배경: GH_3 세포는 TRH에 반응하여 세포막의 수용체와 G 단백, PI-PLC, PKC를 활성시켜 성장호르몬 및 프로락틴을 분비한다고 알려져 있다. PLD는 phosphatidylcholine을 phosphatidic acid(PA)와 choline으로 가수분해하는 효소로서 세포의 증식과 호르몬 분비에 관여한다. 본 연구는 GH_3 세포에서 아직 알려지지 않은 TRH의 PLD 활성에 대한 영향을 규명하고자 하였다.
방법: GH_3 세포를 1.5×10^6씩 분주하고 [^3H] myristate로 표지한 다음에 0.3% 알코올로 전 처치하였다. TRH 등의 시험제를 처치한 후에 메탄올로 반응을 종결하고 세포에서 총 지질을 추출하였다. PLD 활성은 박층크로마토그래피를 이용하여 총 [^3H] phospholipid에서 [^3H] phosphatidylethanol의 비율로 구하였다.
결과: TRH (1μM)의 처치 시에 PLC 활성은 44배 증가하였다. PLD 활성은 TRH (1μM), mastoparan (5μM), PMA(500nM)를 30분간 처치 시에 각각 1.9, 1.5, 2.2배 증가하였다. TRH(1μM)의 시간에 따른 PLD 활성 변동은 15, 30, 60, 120, 240분에 각각 142%, 170%, 172%, 160%, 115%의 증가를 보였다.
결론: GH_3 세포에서 TRH의 호르몬 분비와 세포증식의 신호전달 기전으로서는 PLC 활성뿐 아니라 PLD의 활성도 관여함을 시사한다.
Backgroud: GH_3 cells are a well characterized and widely used model used for the in vitro study of growth hormone (GH) secretion. Thyrotropin releasing hormone (TRH) binds to receptors belonging to the family of G protein-coupled receptors, and secrets both GH & prolactin. Phospholipase D (PLD) is and enzyme that hydrolyses phosphatidylcholine to yield phosphatidic acid and choline, and plays important roles in cellular proliferation and hormonal secretion. To elucidate the pathway of the action of TRH in GH_3 cells, we investigated the activities of PLC and PLD in GH_3 cells treated with TRH or phorbor 12-myristate 13-acetate (PMA).
Methos : GH_3 cells were labeled with [^3H] myristate, followed by incubation of with 0.3% ethanol, prior to before the addition of the agonists. The total lipids were extracted from the harvested cells following treatment with the agonists. The PLD activity was assessed by measuring [^3H] phosphatidylethanol from the [^3H] phospholipid using thin layer chromatography.
Results : TRH (1μM) stimulated the PLD activity by 44-fold over that of the control values. TRH (1μM), mastoparan (5μM), and PMA (500μM) for 30 minutes increased PLD activity by 1.9, 1.5 and 2.2 fold, respectively, in comparison to the controls, The PLD activities after 15, 30, 60, 120 and 240 min treatments of TRH (1μM) were 142%, 170%, 172%, 160% and 115%, respectively.
Conclusion : These results suggest that TRH stimulates not only PLC activity, but also the PLD activity in GH_3 cells (J Kor Soc Endocrinol 17:465∼472, 2002).
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