PCR과 SSCP를 이용한 첨규콘딜롬의 인체 유두종 바이러스의 검색 = Detection of Human Papillomavirus DNA using PCR and SSCP
목적:PCR-SSCP 방법을 작용하여 바이러스의 검출방법을 개발하기 위한 목적으로 본 실험을 실시하였다.
방법:HeLa 세포주, CasKi 세포주 HPV6과 HPV11 감염 첨규콘딜롬 및 10예의 첨규콘딜롬을 대상으로 PCR을 수행하였으며 SSCP 분석을 통하여 형의 구별을 시도하였다.
결과:CasKi 세포주, HeLa 세포주, 2예의 대조군 첨규콘딜롬을 대상으로 약 450bp 크기의 핵산을 증폭할 수 있었으며 BamH1과 Mval의 두가지 제한 효소로 절단하여 각 절편의 특이성을 확인하였다. 특이성이 확인된 PCR절편을 SSCP로 분석하여 각 형에 특이한 전기영동양상을 확인할 수 있었는데 이러한 결과를 이용하여 첨규콘딜롬 10예를 분석한 결과 6예는 HPV6, 4예는 HPV11로 확인되었다.
결론:PCR-SSCP 방법은 바이러스를 검출하는 매우 간단하면서도 신속한 방법으로 생각되었으며 앞으로 감염성인자의 검출이나 변종의 검색 등 여러가지 목적으로 활용될 가능성이 높을 것으로 생각된다.
Background: A simple and rapid screening procedure for the detection of human papillomaviruses(HPV) DNA using polymerase chain reaction(PCR) and single-strand conformation polymorphism(SSCP), was developed.
Methods:HeLa cell lines, CasKi cell lines, and HPV6 and HPV11 infected condyloma cases were used as control samples. Our method enabled us to reduce the number of PCR experiments for the detection of HPV by using common primers for HPV. SSCP followed for the analysis of PCR products amplified from different HPV.
Results: SSCP and heteroduplex analyses of four types of HPV consistently showed the same pattern of migration. Using this pattern as a control, ten cases of condyloma acuminata were analyzed. Out of ten cases, six were found to be HPV6 and four HPV11.
Conclusions: These results suggest that PCR-SSCP is a simple and sensitive method for the detection and typing of HPV in condyloma acuminata lesions.
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