물리적, 화학적, 생물적 요인에 의한 백합 (Lilium longiflorum cv. Georgia) 화분의 생장 및 Agro-Infiltration을 이용한 GUS 발현 = Impact of Physical, Chemical and Biological Factors on Lily (Lilium longiflorum cv. Georgia) Pollen Growth and GUS Expression Via Agro-infiltration

국문 초록 (Abstract)

백합 (Lilium longiflorum cv. Georgia) 화분의 생장과 agro-infiltration에 의한 일시발현에 대한 물리적, 화학적, 생물적 요인의 영향을 분석하였다 화분을 배지에 섞기 위한 물리적 과정이나 agro-infiltration을 위한 진공작업과정은 정상적 화분생장을 위하여 최소화되는 것이 바람직한 것으로 나타났다. 비교적 넓은 범위에서의 온도 (19 to 27$^{\circ}C$)나 pH(5.0 to 8.0)에서 화분의 생장이 유사하게 진행되었으며 화학적 요인으로서의 cefotaxime (300mg/L), acetosyringone (800 $\mu$M), syringealdehyde (800 $\mu$M) 등의 처리는 화분의 생장에 영향을 나타내지 않았다. 그러나 kanamycin의 경우 매우 심한 생장저해현상을 보였는데 25mg/L의 농도에서도 저해현상을 보이는 경우도 있었다. GUS유전자의 화분발현시 acetosyringone(200-400$\mu$M)의 처리에 의하여 그 효율이 약간 향상되는 것으로 나타났으나 syringealdehyde의 경우에는 효과가 없었다. 짧은 시간 내의 agro-infiltration과정과 이어서 18 hr의 화분 및 박테리아의 동시배양으로서도 acetosyringone의 첨가에 상관없이 화분에서의 GUS 일시 발현결과를 얻을 수 있었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

To lily (Lilium longflorum cv. Georgia) pollen, impacts by some physical, chemical and biological factors were examined in respects of its growth and transient gene expression via agro-infiltration. Rolling movement in liquid medium or vacuum pressure during Agro-infiltration was regarded as a impact that should be minimized for normal pollen growth. Pollen growth was maintained well in relatively broad range of temperature (19 to 27$^{\circ}C$) or pH (5.0 to 8.0). Chemical factors such as cefotaxime (up to 300mg/L), acetosyringone (up to 800 $\mu$M) and syringealdehyde (up to 800 $\mu$M) did not show any harmful effects but kanamycin severely did even at concentration as low as 25mg/L in some cases. For GUS gene expression, acetosyringone at 200 to 400 $\mu$M slightly improved the efficiency while syringealdehyde did not. Brief agro-infiltration followed by 18 hr of co-incubation of pollen along with Agrobacterium was suggested as a condition basically required for the transient expression system using lily pollen regardless of the presence of acetosyringone.