To study the correlation between virulence and dye binding of Shigella, 4 invasive strains and 6 non-invasive mutants of S. flexneri to HeLa cell were subjected to investigate the binding ability to congo red, basic fuchsin, safranin and crystal violet in both agar plate and solution.
All virulent strains were pigmented on the agar plate containing dyes and some of avirulent mutants also pigmented. Few strains of avirulent mutants showed different dye binding by the concentration of dyes.
Dye binding in solution, virulent strains were more binding to the dye than avirulent mutants, but there was no significant statistical difference.
Longer the incubation time, more take up the amounts of dyes. But, 1 hour incubated strains were less binding to the dye than 24 hour incubated strains in solution containing crystal violet.
There were not always correlation between agar plate and solution in degree of dye binding.
To study the correlation between virulence and plasmid carriage, electrophoresis of plasmid DNA was carried out. Four invasive strains of S. flexneri harbored 140 megadalton (Mdal) plasmids and all non-invasive mutants of S. flexneri harbored plasmids between 57 and 95 Mdal, instead of 140 Mdal.
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