피부감작성에 있어 Local lymph node의 반응성 연구 = Assessing the sensitizing potency of chemicals for external application with local lymph node assay
저자
이종권 (식품의약품안전청 특수독성부) ; 박재현 (식품의약품안전청 특수독성부) ; 김형수 (식품의약품안전청 특수독성부) ; 정승태 (식품의약품안전청 특수독성부) ; 엄준호 (식품의약품안전청 특수독성부) ; 황인창 (식품의약품안전청 특수독성부) ; 장은정 (식품의약품안전청 특수독성부) ; 윤소미 (식품의약품안전청 특수독성부) ; 남기택 (식품의약품안전청 일반독성부) ; 허용 (대구가톨릭대) ; 오혜영 (식품의약품안전청 특수독성부)
발행기관
학술지명
식품의약품안전청 연보(The Annual report of Korea food & drug administration)
권호사항
발행연도
2001
작성언어
Korean
주제어
자료형태
학술저널
수록면
626-637(12쪽)
소장기관
알레르기설 접촉 괴부염은 다양한 화학물질에 의해 유포될 수 있다. 화학물질이 피부 감작성을 알 킬 수 있는지 여부는 전통적으로 기니픽을 사용한 등물모겔이 이용되어 쏜으나, 최근에는 마우스를 이용한 local Iymph node assily tLLNA) 발법 개발이 요구되고 있떠 본 연구는 focal Iymph not assa)·의 시험방법을 개발하고, 감작을 일으키는 기전을 파악하고자 하였다. 콕헝물질로는 패표적 접촉 알러전인 DffCB(2,4-dinitrochlorobenzone), 호홉 알러젠인 fDl(toluene diisocyanate), 약한 알러젠인Cf.(o-kerplcinamaldehl,do:4, 강한 자극물질인 SLS(sodum lauryl sulfate)를 사용하였다. 각 시험물질 2sr4를 적절한 농도로 6-8주령의 암컷 Balb/c 마우스의 귀의 배측에 3일간 도포한 후 5일째에 부검하여 이개림프절, 귀의 변화 등을 관찰하였다. DNCB, TDI를 도포한 마우스의 이개 림프절의 중량은 대조군에 비해 증가하였으며, 고농도의 HCA를 투여한 마우스에서의 림프절 중량도 증가하였다.
SLS를 투여한 군의 림프걸치 중량은 저농도에서는 변화가 없었으나, 고농도에서는 중량이 증가하였다.
꼬리정맥에 3H-thymidine을 투여하여 림프절의 증식정도를 파악한 결과, BNCB를 도포한 군에서는 프절의 증식지수(Stimulation 1.Idex, Sl)가 용량별로 20.3, 24.6, 27.5로 관찰되었으며, TDI군에서는 각 19.0, 29.T, 42.3으로 관찰되첬고 HCA군에서는 각각 3.8, 9.7, 19.8로 관찰되었다. sLs군에서는 0.8 3.7, 6.6으로 관찰되었다. 이잖끈 결과 fH-thynudine을 이용한 피부 감작성 평가는 기니픽을 대체할수 있는 방법으로 _평가되었다. 그러나 방사선이용이라는 단점과 강한 자극성물질에서의 위양성 반응이 관찰되어 BrdU(Eromodeoklpuddine) 면역조직차학기법으로 시험한 결과 비방사선법도 이용 가능함을 알 수 있었다. 또는 TDI를 처리한 마우스의 림프절에서 cytoklne의 발현을 RT-PCR로 측정한 결과 IL-2 IL-4, U-10과 INf-r의 mRNA발현이 증가하였으며, HCA를 처리한 경우에는 토-4, IL-10. INf-γ mRNA의 발현이 증가 하였다. 또한 B리CB의 경우에는 U-4의 발현이 증가하였다. 그러나, sLs의 경우에는 IL-?, IL-4, 0--10 과 rNF-r꼭 발현이 증가되지 않았다. 이러한 결과는 LLNA를 이용한 c번okine의 n)교NA발현이 유용싼 측정 지포중 하나가 될 수 있을 것으로 생각되며. 특히 IL-4의 발현정도의 증가는 알레르기 유발성을 평가할 유용한 생체지표의 하나가 될 수 있을 것으로 생각되어진다.
Allergic contact dermatitis (skin sensitization) may be caused by a wide variety of chemicals. A murine local lymph node assay(LLNA) has been developed as an alternative to guinea pig models for assessing the contact sensitization potential of chemical. First, the objective of this study was to evaluate allergenecity of chemicals by LLNA. Secondly, we aimed to investigate the possibility of development of non-radio isotopic endpoint for LLNA using immunohistochemistry. Thirdly, we aimed to analyze cytokine mRNA expression of draining lymph node cell in mice exposed to chemical allergen and irritant. In this study, contact allergen, dinitrochlorobenzone (DNCB), respiratory allergen toluene diisocyanate (TDI) and moderate allergen, α-hexylcinnamaldehyde (HCA) were used as positive chemicals and the irritant, sodium lauryl sulfate(SLS) also used as reference chemical. The stimulation index (SI) of lymph node cell in the mice treated with allergens. DNCB, TDI, and HCA were more increased dose-dependently compared to vehicle control by ^(3)H-thymidine uptake. And SI of lymph node cell in strong irritant, SLS were also increased dose-dependently compared to control. The BrdU(Bromodeoxyuridine) LI of lymph node in DNCB and TDI were dramatically increased campared to that of control. However, the LI of lymph node in SLS were not significantly increased compared to vehicle control. This data represents that BrdU LI of lymph node could be one of useful method for screening for irritant and allergen. The expression of IL-2, IL-4, IL-10 and IFN-γ mRNA was increased in draining auricular lymph node cell of the mice treated with TDI by RT-PCR. The level of IL-4, IL-10 and IFN-γmRNA was increased in mice treated with HCA. The expression of IL-4 was increased in lymph node cell of mice treated with DNCB. However, the level of IL-2, IL-4, IL-10 and IFN-γ in lymph node cell of mice treated with SLS was not increased. These results suggest the measurement for increase in level of IL-4 mRNA expression could by one of the method for screening the allergenic potential.
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