출아효모에서 TAR 클론닝법을 이용한 고등동물의 게놈으로부터 특정 염색체 부위의 분리 = Direct Isolation of the Specific Chromosomal Regions from Mammalian Complex Genomes by TAR cloning in Yeast
저자
박정은 (동아대학교 자연과학대학 화학·생명과학부 생명과학전공) ; 윤영호 (동아대학교 자연과학대학 화학·생명과학부 생명과학전공) ; 이윤주 (동아대학교 자연과학대학 화학·생명과학부 생명과학전공) ; 김광섭 (동아대학교 자연과학대학 화학·생명과학부 생명과학전공) ; 윤세련 (동아대학교 자연과학대학 화학·생명과학부 생명과학전공) ; 안태진 (동아대학교 자연과학대학 화학·생명과학부 생명과학전공) ; 임선희 (동아대학교 자연과학대학 화학·생명과학부 생명과학전공) ; 선우양일 (동아대학교 자연과학대학 화학·생명과학부 생명과학전공)
발행기관
동아대학교 기초과학연구소(The Basic Sciences Research Institute of Dong-A University)
학술지명
권호사항
발행연도
2003
작성언어
Korean
KDC
405.000
자료형태
학술저널
수록면
59-65(7쪽)
제공처
복잡한 게놈 분석에 용이하도록 효모의 인공 염색체(YAC) 클론닝 시스템은 발달되어왔다. YAC은 박테리아의 인공 염색체(BAC)보다 더 큰 단편을 클론닝할 수 있고, 또한 클론된 단편을 쉽게 변형시킬 수 있다. 형질전환과 연계된 재조합법(Transformation-Associated Recombination; TAR)은 게놈 라이브러리를 만들지 않고 직접 게놈 DNA로부터 분리하고자 하는 유전자나 특정 염색체 부분을 클론닝 할 수 있는 방법이다. 이 방법은 spheroplast transformation을 수행하는 동안, 목적으로 하는 유전자의 5' 그리고 3' 염기 배열(hooks)을 지닌 TAR 벡터와 게놈 DNA 사이에서 일어나는 상동성 재조합에 의해 이루어진다. 효모 내의 in vivo 재조합을 이용한 TAR 클론닝법은 복잡한 게놈으로부터 목적의 염색체 부분을 원형 YAC의 형태로서 선택적으로 분리할 수 있다. 그러므로 TAR 클론닝 법은 특정 염색체로부터 YACs을 만드는데 매우 유용하여, 전체 게놈으로부터 특이적 유전자나 유전자의 family를 분리하는데 효과적인 방법으로 사료된다.
Yeast artificial chromosome (YAC) cloning systems have advanced the analysis of complex genomes considerably. They permit the cloning of larger fragments than do bacterial artificial chromosome systems, and the cloned material is more easily modified. Transformation-associated recombination (TAR) is a cloning technique that allows specific chromosomal regions or genes to be isolated directly from genomic DNA without prior construction of a genomic library. This technique involves homologous recombination during spheroplast transformation between genomic DNA and a TAR vector that has 5' and 3' gene targeting sequences (hooks). Using in vivo recombination in yeast, TAR cloning selectively isolates, as circular YACs, desired chromosome segments or entire genes from complex genomes. We propose that TAR cloning can provide an efficient means for generating YACs from specific chromosomes and that TAR cloning may be useful for isolating families of genes and specific genes from total genome DNA.
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