아토피 피부염을 억제하는 물질의 탐색 및 기전 연구 = Screening of Mechanism Study of an Inhibitor Substance for Atopic Dermatitis

국문 초록 (Abstract)

최근 산업화된 사회로 인해 생활환경의 변화, 환경오염과 대기오염 등에 의해 발생되는 생물학적, 화학적 유해물질들에 대한 노출은 아토피 피부염, 천식, 알레르기 비염 등 알레르기 질환을 꾸준히 증가시키고 있다. 그 중 아토피 피부염은 아토피가 동반된 염증성 피부질환으로 심한 가려움증, 홍반, 피부건조증, 부종 그리고 습진을 특징으로 하는 비전염성의 만성 재발성 피부질환이다. 그러나 약품의 과량 또는 장기간 사용에 따른 부작용이 문제점으로 지적되고 있어 부작용을 최소화 하면서 아토피 피부염을 억제하는데 효과적인 새로운 아토피 피부염 치료제의 개발이 필요한 실정이다.
Histamine은 일반적으로 비만세포 내에 과립형태로 존재하고 비만세포의 과립으로부터 가장 먼저 방출되는 화학적 물질로써 혈관확장, 알레르기 반응, 기관지 평활근에 대한 수축작용 등을 유발시키는데 가장 중요한 분자이며 체내에 histidine decarboxylase 반응을 통해 생합성된다. 이와 같이 알레르기 반응에 있어 histamine은 핵심적인 역할을 하고 있으며 아토피 피부염의 알레르기 반응정도를 측정하는데 많이 이용된다. 또한 염증반응에서 inducible nitric oxide synthase (iNOS) 발현에 의한 nitric oxide (NO)의 염증 촉진 매개물은 염증반응이 유도되어 아토피 피부염을 더욱 악화시키는 것으로 알려져 있다.
본 연구에서는 부작용이 적으면서 보다 안정적인 천연물자원으로부터 아토피 피부염 억제효과를 가지는 물질을 탐색하기 위하여 PMA와 A23187로 유도된 비만세포에서 628종의 천연물자원을 이용하여 screening을 실시한 결과, 아토피 피부염 억제효과에 활성이 있는 백반, 녹반, 밀타승, 월석을 선별할 수 있었다. 따라서 백반, 녹반, 밀타승, 월석 methanol 추출물에서 아토피 피부염 억제효과를 가지는 물질을 확인하기 위해 다양한 생물학적 실험을 실시하였다. HMC-1 세포에 다양한 농도의 백반, 녹반, 밀타승, 월석과 탈과립을 유도하는 PMA와 A23187을 처리하였을 때, 형태학적 변화 및 β-hexosaminidase assay를 통해 탈과립 억제효과를 확인하였으며 다양한 농도의 백반, 녹반, 밀타승, 월석과 염증을 유도하는 LPS를 처리하였을 때, NO production assay를 통하여 염증 억제 효과를 확인하였다. 따라서 본 연구에서는 PMA와 A23187로부터 탈과립이 유도된 비만세포와 LPS로부터 염증이 유도된 대식세포에서 백반, 녹반, 밀타승, 월석의 아토피 피부염 억제 효과를 확인할 수 있었으며 백반, 녹반, 밀타승, 월석이 탈과립 및 염증 억제에 대한 천연물자원 신약소재로서의 가능성을 제시하고자 하였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Histamine is present in granules form in mast cells, is the first chemical substance released from granules of mast cells. It is the most important molecule that causes vasodilation, allergic response, and contraction of the bronchial smooth muscle. Thus, histamine is a key role in the allergic response and used as a measure allergic response of atopic dermatitis. In addition, it is known that in the inflammatory response, atopic dermatitis aggravated by induction of inflammatory response is inflammatory mediat of nitric oxide (NO) by inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression.
In this study, we conducted a screening of 628 species from less side effects and stable natural resources, and identified that Alunitum, Melanterite, Plumbum, Borax exhibit a inhibition effects of degranulation against PMA plus A23187-induced degranulation in mast cells. Therefore, several biological experiments were conducted to investigate the inhibition effects of atopic dermatitis of methanolic extracts of Alunitum, Melanterite, Plumbum, Borax. The cells were exposed to PMA plus A23187-induced degranulation were treated with various concentrations of Alunitum, Melanterite, Plumbum, Borax. This treatment resulted in the induction of dose-dependent inhibition effects of degranulation, which was evidenced by the results of morphological change, β-hexosaminidase assay. also dose-dependent inhibition effects of inflammation, which was evidenced by the results of NO production assay. In conclusion, studies show inhibition effects of atopic dermatitis from Alunitum, Melanterite, Plumbum, Borax against PMA plus A23187-induced degranulation in HMC-1 cells and LPS-induced inflammation in RAW 264.7 cells.
These results suggest that Alunitum, Melanterite, Plumbum, Borax is a useful natural resources and it is may be the possibility as a new drug material.

목차 (Table of Contents)

• 제 1장 서 론=1
• 제 2장 Mineral 추출물로부터 아토피 피부염 억제 효과=3
• 2.1 서론=3
• 2.2 재료 및 방법=5
• 2.2.1 실험재료=5
• 2.2.2 세포주 배양=5
• 2.2.3 추출물 제조=6
• 2.2.4 형태학적 변화 관찰=6
• 2.2.5 β-hexosaminidase release assay=7
• 2.2.6 Nitric Oxide production assay=7
• 2.2.7 WST reduction assay=8
• 2.2.8 MTT reduction assay=8
• 제 3장 결과 및 고찰=10
• 3.1 결과=10
• 3.1.1 비만세포주로부터 PMA와 A23187의 탈과립 측정=10
• 3.1.2 비만세포주에 대한 Mineral 추출물의 탈과립 억제 효과=10
• 3.1.3 대식세포주에 대한 Mineral 추출물의 염증 억제 효과=11
• 3.1.4 Mineral 추출물의 자체독성 평가=11
• 3.2 고찰=12
• 참고문헌=22
• ABSTRACT=26