大腸菌外膜タンパク質遺傳子 ompF, ompC の正の調節因子 OmpR タンパク質に關する硏究

국문 초록 (Abstract)

대장균의 ompR유전자의 산물인 ompR단백질은 외막단백질 OmpF, OmpC를 각각 code하 고 있는 유전자 ompF, ompC의 발현에 있어서 positive regulator로서 알려져 있다. 이 러한 OmpR단백질은 유전학적인 면에서는 광범위하게 그 기능이 해석되어 있으나 생화 학적 성질은 전혀 알려진 바가 없다. 그래서 OmpR단백질 정제 및 그 생화학적 성질과 기능을 해석하는 것으로부터 ompF, ompC유전자의 발현조절에 대한 분자기구를 해석 하였다. 1. OmpR단백질의 정제와 성질 ompR유전자를 run-away plasmid에 cloning하여 OmpR단백질의 대량생산계를 확립하였다. 이 대량생산계를 이용하여 OmpR단백질을 전 기영동적으로 균일하게 정제하였다. 이 정제된 OmpR단백질은 그 생화학적 성질의 해 석으로부터 단량체로 존재함이 밝혀졌으며, 유전학적 해석으로부터 ompF, ompC유전자 의 promoter의 upstream에 결합하는 것이 예상되고 있었으나, 정제 OmpR 단백질을 이 용하여 DNA와 결합능을 해석하는 것으로부터 ompF, ompC유전자의 upstream영역의 DNA 와 특이적으로 결합하는 것을, 직접적으로 해석할 수 있었다. 2. OmpR단백질에 의존한 ompF, ompC유전자의 in vitro transcription 정제한 야생형 및 변이 OmpR단백질을 이 용하여, OmpR단백질에 의존한 in vitro transcription계의 확립과, 이 확립된 계를 이 용하여 ompF, ompC유전자의 발현조절기구를 해석하였다. 그 결과 OmpR단백질에 의존 한ompF, ompC유전자 promoter의 in vitro transcription계를 확립할 수 있었다. 확립 된, in vitro transcription계에서는 정제한 야생형 OmpR단백질은 ompF, ompC promo ter를 동시에 활성화하였다. 그러나 ompC의 promoter가 충분히 활성화하기 위해서는 ompF promoter의 활성에 필요한 양보다 다량의 OmpR단백질을 필요로 하였다. 또 변 이 단백질인 ompR�４炳溶珦�ompF promoter를 활성화하여, promoter의 특이성을 나타 내었다. 이 결과는 ompR�：�訣聆�표현형 (ompF�� ompC��와 잘 일치하고 있다.