구연발표 : Melanoma In Situ에서의 DAB를 이용한 SOX10 염색

국문 초록 (Abstract)

배 경 HMB45는 Melanoma In Situ 진단을 위한 유용한 세포질 마커이나 피부조직의 경우Keratinocyte, Melanocyte 및 일반 멜라닌색소가 혼재하여, DAB 발색의 경우, Melanomacyte 감별에 신중함이 요구되었다. HMB45는 Melanoma In Situ 진단을 위한 유용한 세포질 마커이나 피부조직의 경우Keratinocyte, Melanocyte 및 일반 멜라닌색소가 혼재하여, DAB 발색의 경우, Melanomacyte 감별에 신중함이 요구되었다. 세포질에 존재하는 HMB45의 위 양성을 배제하기 위해 표백(bleaching)을 시행하거나Red 발색을 시행하는데, 표백을 할 경우 조직 손상이나, 심할 경우, 조직 탈락의 문제가있으며 Red 발색은 조직 손상을 예방하고 멜라닌색소로 인한 위양성을 배제할 수는 있으나 검사건수가 많지 않아 고가의 시약을 유효기간 내에 소모하지 못하고 폐기해야하는 단점이 있다. Anti-human goat SOX10(SantaCruze)은 HMB45와 달리 Melanocyte 마커이며 핵 내항원으로 Keratinocyte 및 일반 멜라닌색소와 감별에 유용성이 있을 것으로 판단하였다. 이에 본고에서는 SOX10과 HMB45에 대해 DAB와 Red 발색을 시행하였으며 이를 통해SOX10의 유용성을 검토하고자 하였다. 방 법 2009년 이후 서울아산병원에서 Melanoma In Situ진단을 받은 20예의 피부검체를 대상으로 하였으며 자동염색기는 Ventana BenchMark XT, 검사법은 Multimer Method로 DAB 발색은 UltraViewTM DAB Kit(Ventana Roche), Red 발색은 UltraViewTM RED Kit(Ventana Roche)를 사용하였으며 SOX10(SantaCruze, Goat) 검출을 위한 링커로 BiotinConjugated Anti-Goat Rabbit Ig(DAKO)를 사용하였다. 항체는 HMB45(DAKO, Mouse), SOX10(SantaCruze, Goat)를 사용하였고 두 항체 모두CC1(VENTANA) 용액을 사용하여 HIER 60분 처리하였다. 결 과 HMB45의 경우 DAB발색을 시행한 결과에서는 멜라닌색소와 구별할 수 없었으며 Red발색을 시행한 결과에서도 Keratinocyte와 Melanocyte에 동시에 염색되었다. SOX10의 경우 DAB와 Red발색 모두 Melanocyte에만 염색되었다. 핵 내 염색됨으로써 멜라닌색소와 감별이 용이하였으며 20예 모두 DAB발색을 시행한 검체에서 Melanocyte의 감별에 어려움이 없었다. 고 찰 SOX10은 Melanocyte 특이항체로 Melanoma In Situ감별에 HMB45보다 우수하였으며 표백이나 Red발색이 아닌 DAB 발색으로 감별이 용이하여 검사자 및 판독의 모두에게 유용할 항체가 될 것이며 이원화된 Kit사용 및 관리로 인한 불필요한 시간소모를 제거할수 있을 것으로 보인다. 또한 본고에서는 Ventana 자동염색기에서 Goat 항체를 사용할 경우 Protocol 설정법이 소개되었다. TFE3 gene fusions 신장종양의 중요 마커인 TFE3(SantaCruze, Goat)를 검출할 경우 상기 Protocol을 적용할 경우 우수한 결과를 얻을 수 있을 것으로 사료된다.