SCOPUS
KCI등재
SCIE
당뇨병을 유발하는 Virus 에 대한 Monoclonal Antibody 의 생산과 검정 = Production of Biologically Active Peptides by Genetic Engineering)
저자
고광삼 (조선대. 의과대, 생화학교실)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1983
작성언어
Korean
KDC
476.000
등재정보
SCOPUS,KCI등재,SCIE
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
75-76(2쪽)
제공처
소장기관
1975년 영국의 Medical Research Council에서 일하던 Ko¨hler와 Milstein이 sheep RBC(SRBC)로 면역시킨 Balb/c mouse의 spleen cell과 myeloma cell을 융합시켜, SRBC에 특이하게 결합하는 항체를 생산할 뿐만 아니라 세포배양에서 영구히 살 수 있는 잡종세포를 만들어 냄으로써, hybridoma cell의 개념이 확립되게 되었다. Hybridoma란 특이항체를 생산하는 plasmacyte와 영구히 세포배양이 가능한 plasmacytoma간의 세포융합에 의해 만들어진 잡종세포로서, 양쪽 세포의 유전자를 다 갖게되어 plasmacyte의 특이항체를 생산하는 성질과 plasmacytoma의 세포배양에서 영구히 분열증식하는 성질을 동시에 갖는 세포를 말한다. Hybridoma cell이 생산하는 항체는 monospecific한 특징을 갖는 monoclonal antibody로서 영구히 세포배양을 통해서 다량으로 얻을 수 있는데, 이 항체는 immunoglobulin이 Fab sequence가 동일하여 항원과의 결합력이 일정하며, 특이성이 매우 높다.
본인은 encephalomyocarditis virus의 M variant 중에서 당뇨병을 일으키는 것으로 알려진 D variant와 당뇨병을 일으키지 않는 것으로 알려진 B variant를 일반적인 방법으로 구별할 수 없으므로, 이를 hybridoma technique을 이용하여 구별하고자 D variant를 항원으로 하여 Balb/c mouse를 일주일 간격으로 처음에는 5.0×10^(5)PFU로 시작하여 마지막에는 1.0×10^(7)PFU의 용량으로 2개월간 면역시킨 다음, 이 mouse의 spleen cell을 myeloma cell(NS-1)과 Polyethylene glycol(PEG)을 이용하여 융합시킨 다음, HAT(Hypoxanthine, Aminopterine, Thymidine) media 중에서 잡종세포만을 선별하였다. 이를 cloning한 다음, ELISA법을 이용하여 monoclonal antibody를 생산하는 세포와 생산하지 않는 세포를 분리한 다음, 이들 clone들을 면역학적, 생화학적, 세포생물학적 방법으로 검정하였다. 그 결과 이 hybridoma cell은 특정한 항원인 encephalomyocarditis virus의 D variant를 동정(identify)하는 monospecific antibody를 생산하였으며, monoclonal antibody를 생산하는 hybridoma cell은 이를 생산하지 않는 세포보다 RNA-dependent DNA polymerase 활성도가 높음을 알 수 있었고, 이 효소의 활성도가 높은 hybridoma cell에서는 특이하게 많은 수의 extracellular C-type virus particle을 볼 수 있었으며, 반대로 이 효소의 활성도가 낮은 세포에서는 많은 수의 intracellular C-type virus particle을 볼 수 있었다.
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