SCI
SCIE
SCOPUS
Development of an <i>in vitro</i> antigen‐detection test as an alternative method to the <i>in vivo</i> plaque reduction neutralization test for the quality control of Japanese encephalitis virus vaccine
저자
Kim, Do Keun ; Kim, Hye‐ ; Youn ; Kim, Joo‐ ; Young ; Ye, Michael B. ; Park, Kee‐ ; Bum ; Han, Euiri ; Kim, Jaeok ; Ja Ban, Sang ; Hong, Seung Hwa ; Park, Yong Keun ; Nam, Jae‐ ; Hwan
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2012
작성언어
-주제어
등재정보
SCI,SCIE,SCOPUS
자료형태
학술저널
수록면
463-471(9쪽)
제공처
소장기관
<P><B>ABSTRACT</B></P><P>Japanese encephalitis virus (JEV) causes diseases that attack the human central nervous system. Traditionally, the quality control for JEV vaccines, in which the plaque reduction neutralization (PRN) titer is measured by the national control laboratories before the vaccine batches are marketed, has required laboratory animal testing. However, classical animal tests have inherent problems, including the very fact that animals are used, ethical issues, and the possibility of error. In this study, JEV antigen was measured in an <I>in vitro</I> assay to assess the feasibility of replacing <I>in vivo</I> assays that measure the PRN titers of JEV vaccines. We constructed a double‐sandwich enzyme‐linked immunosorbent assay (DS‐ELISA) that could detect JEV envelope (E). Initially, monoclonal antibodies (mAbs) directed against the JEV E protein were generated and characterized. We isolated 18 mAbs against JEV E protein, and most were the IgG1 or IgG2a isotype. The mAbs (5F15 and 7D71) were selected as the most suitable mAb pair to detect JEV E protein. DS‐ELISA with this pair detected as little as approximately 3 μg/mL JEV E protein and demonstrated a relationship between the amount of JEV E protein and the PRN titer. From these results, we surmise that this DS‐ELISA may be useful, not only in terms of measuring the amount of JEV E protein, but also as a substitute for the PRN test for JEV vaccine evaluation.</P>
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