KCI등재
연구논문 : Balb/c 마우스를 이용한 비방사선 BrdU:ELISA 국소림프절 시험법의 연구 = Original Articles : A non-radioisotopic endpoint using BrdU ELISA for Local Lymph node assay in Balb/c mice
저자
정경미 ( Kyoung Mi Jung ) ; 장원희 ( Won Hee Jang ) ; 박영호 ( Young Ho Park ) ; 임경민 ( Kyung Min Lim )
발행기관
학술지명
동물실험대체법학회지(Journal of alternatives to animal experiments : KSAAE)
권호사항
발행연도
2010
작성언어
Korean
주제어
KDC
511.905
등재정보
KCI등재
자료형태
학술저널
수록면
45-50(6쪽)
제공처
To avoid the use of radioisotopes, many efforts have been made to develop non-radioisotopic modifications of the LLNA. Recently, OECD presented a guideline for the nonradioisotopic murine local lymph node assay employing BrdU incorporation and ELISA. This method was a non-radioisotopic modification of the LLNA using 5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU) incorporation. However, this method recommends CBA strain mice which is not common in Korea. Here we evaluated the sensitivity of the LLNA:BrdU-ELISA using the Balb/c mice strain, which is a readily available strain in Korea. According to OECD draft guideline, female Balb/c mice were treated for 3 days with a test material or vehicle to each side of both ears and BrdU was given as a intraperitoneal administration at 5 mg/mouse. We found that Balb/c mice is sensitive to BrdU and some premature deaths were found in the treatment groups. Balb/c mice must be older than 11 weeks to tolerate BrdU. BrdU incorporation into draining lymph node cells was measured using ELISA. In this study, isoeugenol, hexylcinnamic aldehyde(HCA), eugenol and isopropanol(IS) were used as reference chemicals. When the 1.6 or greater SI values were defined as sensitizer according to OECD draft guideline, isoeugenol, HCA and eugenol which are classified as moderate and weak sensitizers in the traditional LLNA, were found to evaluate positive results. LLNA:BrdU-ELISA using Balb/c mice, sensitivity and specificity were 100%. The EC1.6 values for isoeugenol, HCA and eugenol were calculated to be 1.8, 19.3 and 15.5% in 5 mg BrdU/mouse. A positive correlation (R2=0.813) between traditional LLNA and LLNA:BrdU-ELISA strongly suggests that the LLNA:BrdU- ELISA could be used as an alternative method to screen allergen.
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