KCI등재후보
백화사설초 메탄올 추출물에 의한 HL-60 세포고사과정에 있어서의 transcriptional factors 활성변화 연구 = Study on Transcriptional Factors Activation Change of HL-60 cell Apoptosis by Hedyotis Diffusa's Methanol Extract
저자
박상구 ; 이지현 ; 문구 ; 문석재 ; 원진희 ; 박래길 ; Park, Sang-Goo ; Lee, Ji-Hyun ; Moon, Gu ; Moon, Suk-Jae ; Won, Jin-Hee ; Park, Lae-Gil
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2000
작성언어
Korean
주제어
등재정보
KCI등재후보
자료형태
학술저널
수록면
67-79(13쪽)
제공처
Objective : Hedyotis diffusa has been used as an anticancer agent for several decades in oriental medicine. We test whether the methanol extract of the herb affects transcriptional activation factors including $NF-{\kappa}B$ and AP-1. Methods : 1. HL-60 cells were treated with various concentrations(from 200 to $50{\mu}g/ml$) of methanol extract and $H_2O$ extract($200{\mu}g/ml$)of hedyotis diffusa, After 48h later, the cells were tested for viability by MTT assay. 2. The HL-60 cells were treated with $200{\mu}g/ml$ of methanol extract for the indicated periods. First. Nuclear extracts were isolated and incubated with oligonucleotide probe of $NF-{\kappa}B$ and AP-1. Second. Nuclear extracts were isolated and reacted with p50, p65. c-rel pan-Jun, c-Jun, JunB. JunD antibody on ice for 30min. Finally The cell lysates were prepared and analyzed by western blotting using anti-Fas, anti-FasL and anti-p53 antibody. Results : 1. The methanol extract decreases the viability of human lymphoid origin leukemia HL-60 cells in a dose-dependent manner. 2. $NF-{\kappa}B$ is rapidly activated by the addition of the methanol extract, reaches a peak at 30min and gradually returns to resting level. We confirm that $NF-{\kappa}B$ is a heterodimer mainly composed of p65 subunit with c-Rel. 3. Transcriptional activation of AP-1 is detected at 30min and reaches a maximum at 1hr after stimulation of the cells with the methanol extract. AP-1 is mainly composed with Jur-D and partially Jug-B proteins. 4. the methanol extract of Hedyotis diffusa induces the expression of Fas, Fas ligand and p53 proteins of HL-60 cells in a time dependent fashion. Conclusions : These results suggest that the methanol extract of Hedyotis diffusa exerts anticancer effects to induce the death of human leukomic HL-60 cells via activation of trascriptional factors such as $NF-{\kappa}B$ and AP-1, increase in expression of Fas mediated signalling proteins, and induction of tumor suppressor gene. p53.
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