Mycobacterium fortuitum-chelonei complex 균체항원의 민감성과 특이성 = Sensitivity and Specificity of Antigenic Preparations of Mycobacterium fortuitum-chelonei complex
Antigenic preparations were made from seven strains of Mycobacterium fortuitum-chelonei complex(MFCC) extracted with phosphate buffered saline(PBS extracts), with 10%, trichloroacetic acid solution (TCA extracts) and with veronal buffered saline solution containing 0.1% Triton X-100(Triton extracts). Serologic reactivities of the antigenic preparations were assayed for immune precipitation by Ouchterlony double diffusion in-gel technique against antisera of rabbits immunized with M. fortuitum TMC 1529 and M. chelonei TMC 1544.
Antigenic relationships between Triton extracts of M. fortuitum and M. chelonei were analyzed by two-dimensional immunoelectrophoresis(2D-IE) and fused rocket immunoelectrophoresis(FRIE).
The results obtained are summarized as follows:
1. Of antigenic preparations of PBS extracts, TCA extracts and Triton extracts, the Triton extracts and the PBS extracts proved to be active for immune precipitation, but the TCA extracts was inactive. The precipitation reaction of Triton extracts was more sensitive than PBS extracts, and the precipitation reaction of Triton extracts was enhanced by disintegration of cells with sonification, but the cross reaction was also increased.
2.' The Triton extracts of 5 strains of M. fortuitum exhibited 9 common precipitinogens with reference serum against TMC 1529 and one common precipitinogen with reference serum against TMC 1544. but the antigens of TMC 1544 with or without disintegration of cells gave a specific precipitinogen with reference serum against TMC 1544 in addition to a common precipitinogen.
3. Although the electrophoretic patterns of Triton extracts obtained from different strains and species were not demonstrated, 7 strains of the MFCC could be divided into four groups by the relative electrophoretic mobilities(REM) of the antigens with respect to bovine serum albumin(REM value); group Ⅰ(REM =0.18) 2 strains, group Ⅱ(REM = 0.27) 2 strains, group Ⅲ (REM = 0.38) 2 strains and group Ⅳ(REM = 0.49) 1 strain, but the existence of any significant relationship between the REM value and species was not recognized.
4. By means of FRIE, the presence of 3 to 5 common precipitinogens and 1 to 2 species-specific precipitinogens were observed in the Triton extracts of M. fortuitum and M. chelonei.
5. By the use of the reference antisera with a titre of at least 1 : 80 against M. fortuitum TMC 1529 and M. chelonei TMC 1544, the strains of M. fortuitum and M. chelonei could be differentiated by FRIE.
In conclusion, this study established that the Triton extracts of the MFCC proved to be active for immune precipitation and contained species-specific procipitinogens, and reproducible amounts of such an antigen for immunodiffusion test could be easily prepared with one plate of heavy cultures.
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