C형 간염바이러스 검출을 위한 역전사효소-중합효소연쇄반응 방법들의 비교 = Comparison of reverse transcriptase-polymerase chain reaction methods for detection of. hepatitis C virus RNA
저자
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1998
작성언어
Korean
주제어
KDC
510
자료형태
학술저널
수록면
85-91(7쪽)
제공처
HCV-RNA의 검출은 역전사효소를 사용하여 HCV-RNA를 HCV cDNA로 전환한 후 중합효소 연쇄반응으로 검출하는 역전사효소-중합효소 연쇄반응을 이용하며, C형 간염의 진단과 치료 판정에 매우 유용하지만, 검사 과정에 시간과 노력이 많이 들고 위양성과 위음성의 위험이 있어, 실제 임상 검사실에서 일상적으로 시행하기에는 여러 가지 문제점이 있어 왔다. 이에 저자들은 대부분의 시약을 본 검사실에서 만들어 사용하던 본원의 방법과 역전사 반응과 1차 중합효소 연쇄반응이 한 tube에서 시행되도록 고안된 2가지의 HCV RNA detection kit를 비교하고 그 유용성에 대해서 검토하여 보고자, 중앙대학교 부속병원에서 HCV RNA가 검출되었던 양성 검체 30개와 C형 간염 항체는 양성이었으나 HCV RNA가 검출되지 않았던 음성 검체 10개를 대상으로 본 연구를 시행하였다.
HCV RNA 양성 검체 30개 중 HCV RNA를 검출해내지 못한 경우는 본원의 방법에서 2, 검체, kit A와 kit B의 방법에서 각각 3 검체로 비슷한 결과를 나타내었고, HCV RNA가 검출되지 않았던 음성 검체 10개 중 1검체에서 kit B에서만 HCV RNA가 검출되었다. 한편, 본원의 검사법이 매우 번거롭고 시간과 노력이 많이 드는데 비해, 2 가지의 HCV detection kit는 모두 RNA 추출과정도 매우 간단하고 cDNA 합성과 1차 PCR이 한 tube에서 동시에 시행된다는 장점을 갖고 있으며, 검사 비용도 비교적 경제적이었다. 그러나 본원의 방법을 포합한 3 가지 방법 모두 상당한 불일치를 보여주고 있어, 동일한 검체의 반복 검사시 문제시되는 재현성의 향상을 시판되는 kit에서도 여전히 남아 있는 것으로 판단되었다.
결론적으로 기존의 방법에 비해 시판되는 kit는 검사 시간과 노동력 절감의 효과는 있으나, 재현성의 향상은 개선되지 않은 것으로 판단되었다.
Diagnosis for the hepatitis C virus(HCV) infection currently is based on the detection of anti-HCV antibodies or HCV RNA. The HCV RNA in the patient's sera can detected in the early acute infection stage before antibody appearance or aminotransferase elevation and from the chronic patients who failed to produce antibodies. This technology, however, has not been standadized well and is laborious and expensive. Two HCV detection kits(A and B) were compared with HCV reverse transcriptase-polymerase chain reaction(RT-PCR) method of Choun-Ang University Hospital to establish the most sensitive and relaible method for HCV RNA detection. We tested 30 HCV RNA positive and 10 HCV RNA negative sera. Agreement with three HCV RT-PCR methods was 82.5%. In using HCV detection kits, the reverse transcription and first round PCR step are carried out in a single tube. The lesser manipulations reduced risks of contamination and labour. But the two kits appeared not to be improved in sensitivity and reproducibility of the HCV RT-PCR test.
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