학술논문발표 : 제목: 동결절편 검사에서 brain tissue의 ice artifact 해결방법
배 경 : 동결절편 검사는 수술실에서 오는 검체를 냉동시켜서 신속하게 표본으로 제작하여 수술 범위 및 치료방침을 결정하고 악성세포의 유/무를 확인하는 검사이다. 동결절편 검사는 20분 이내에 결과보고까지 마쳐야 하는 검사로 신속하고 정확하게 검사하려면 업무에 있어서 많은 제약이 따른다. 여기에는 시간의 제약, 협의부족, freezing artifacts 등 여러 가지 문제가 있다. 본원에서 연평균 brain tissue의 동결절편 검사 건수는 30건 내외인데 ice artifact로 인한 진단의 어려움이 종종 있었다. ice artifact는 물이 얼음이 되어가는 과정에서 발생하는 것이어서 검사할 조직의 빠른 급속동결을 위해서 quick frozen spray를 뿌려보기도 하고, mobile heat extractor를 눌러서 얼려보기도 했는데 미비하게 개선이 되었다. 그래서 급속 동결을 할수 있는 초저온수조를 도입하여 검사에 활용하였다. 방 법 : 얼음결정으로 인한 조직상해를 가능한한 줄이기 위해 초저온수조에 들어가는 시약은 isopentane을 사용했으며 isopentane은 액체질소로서 어는점이 -160℃이고 무색의 알코올 냄새가 나는 시약이다. <Isopentane을 이용한 초저온수조에서의 급속동결법> 1) Brain tissue의 동결절편 검사가 접수가 되면 tissue의 물기를 거즈를 이용해 최대한 빠르게 제거한다. 2) Disc 위에 OCT compound를 올리고 물기를 제거한 tissue를 올린 후 그 위에 다시 OCT compound를 올린다. 3) Isopentane이 들어 있는 초저온수조에서 넣고 급속동결 후 박절한다. 결 과 : 뇌종양은 뇌종양을 구성하는 세포에 따라서 신경교종, 뇌수막종, 신경초종, 뇌하수체종양 등으로 구분할 수 있다. 본원에서 검사한 케이스 중 신경교종에서 악성인 교모세포종(glioblastoma)은 괴사와 혈관내피세포증식, 다형성유사분열, 핵의 울타리모양배열의 특징적인 소견을 보여야 하며 이 중 괴사와 혈관내피세포증식은 아주 중요한 특징이다. 또한 뇌를 둘러싸고 있는 지주막세포(arachoid cell)에서 기원하는 종양인 수막세포 수막종(meningothelial meningioma)은 세포와 세포사이가 뭉쳐있는 syncytium과 사종체(석회화)가 있으면 수막세포수막종으로 확진할 수 있다. 이렇듯 동결절편 검사에서도 위와 같은 종양들의 특징적인 소견들이 보여야 진단이 가능한데 기존 동결방법(-20℃)으로 검사하면 ice artifact로 인해서 사진에서 보이는 것처럼 세포와 세포 사이가 많이 비어있고, 구멍이 뚫린 것처럼 보이고 핵이 한쪽으로 밀려나 있어서 각 진단들의 특징적인 소견을 찾아내기가 어렵다. 그러나 급속동결(-70℃) 방법으로 검사한 케이스에서는 종양들의 특징적인 형태가 잘 보이고 있고, 핵의 모양도 밀려나 있지 않고 형태를 유지하고 있다. 고 찰 : 초저온수조를 도입하여 급속동결을 이용한 brain tissue의 검사방법은 현재까지 잘 이루어지고 있다. brain tissue 동결절편 검사가 오면 즉시 검사하는 것보다는 조직에 뭍어 있는 물기를 제거하고 급속동결을 하는 것이 더 상태가 좋은 것으로 나타났다. 다만 급속동결 후 박절시 부서지는 현상은 조직 표면을 조금 따뜻하게 한 뒤 박절하면 좋아졌으며, 초저온수조를 도입함으로서 동결절편 검사 시간이 많이 단축되는 효과를 보였다. 그리고 조직 동결시 사용하는 시약인 isopentane은 유독성, 휘발성 물질이므로 취급시 장갑과 마스크를 착용 후 사용해야 하며 초저온수조의 설치도 배기장치가 되어있는 곳에 설치하길 권장한다.
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