Effect of Alcohal on Norephrine-Stimulated Phoshoinositide Hydrolysis in Cultured Astrocytes = 알코올이 배양된 뇌상새포내에서 놀에피네프린유발 포스포인노시타이드 가수분해에 미치는 영향
저자
KIM, Hun-Soo (Department of Neuropsychiatry, College of Medicine, Chung-Ang University)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1987
작성언어
English
KDC
510
자료형태
학술저널
수록면
551-565(15쪽)
제공처
길항제 유발에 의한 포스포인노시타이드(agonist-induced phosphoinositide)분해는 cAMP 체제와 유사한 방법으로 홀몬이나 신경전달물질의 작용을 중재하는데 중요한 역할을 하는 것은 알려져 왔다.
포스포티덜인노시톨-4,5- 디포스페이트 분해 산물은 디아실그리세롤(diacylglycerol)과 인노시톨트리포스 페이트로서 디아실그리세롤은 단백질 부활소C를 자극하고,인노세톨트리포스페이트는 Ca^2+를 이동시키는 2차전령으로 작용한다.
뇌성상세포내에서 놀에피네프린은 포스포인노시타이드 분해를 가장 크게 자극한다. 이런 분해는 알파-1 아드레날린성 수용체를 통해 조정된다.
본 연구에서는 신생아 쥐(neonata) rat)의 뇌에서 추출된 성상세포를 사용하여 알코올이 놀에피네프린 유발에 의한 포스포인노시타이드 분해에 미치는 영향을 알아보고자 시도되었다.
알코올을 넣은 배지와 넣지 않은 배지 속에서 자란 성상세포에 ^3H 인노시톨을 표찰시켜 ^3H 인노시톨포스페이트의 축적을 10^-5M의 놀에피네프린하에서 측정하였다. 그 결과 25-200mM알코올에 큽성 노출시킨 성상세포에서는 놀에피네프린올 유발시킨 포스포인노시톨 분해에 거의 영향을 주지 않았다. 그러나 7일 동안 같은 노도에 만성적으로 노출된 성상세포에서 50mM의 알코올 농도에서부터 포스포인노시톨의 자극적 분해는 통계적으로 유의하게 증가했다. 특히 200mM 알코올 농도에서는 알코올이 없는 배지에서 자란 성상세포에서 일어난 포스포인노시톨 분해보다 3배나 더 높았다.
100mM과 500mM의 알코올에 만성적으로 각기 다른 시간에 노출된 성상세포 내에서 놀에피네프린에 유발된 포스포인노시타이드 분해는 알코올에 노출된지 4시간부터 의미 있게 증가하기 시작했다. 100mM과 500mM 알코올에 노출된지 하루 지나고 나서는 자극된 분해는 고원부(plateau)의 상대를 유지했고, 3-5일 동안 노출된 성상 세포내에서 가장 크게 자극된 분해가 일어났다.
놀에피네프린의 모든 농도에서 포스포인노시타이드 분해는 알코올이 없는 배지에서 자란 세포에서 보다 100mM 농도의 알코올 배지에서 자란 세포에서 더 자극 받았지만, 100mM 농도의 알코올배지에 만성적으로 노출된 세포내에서 포스포인노시타이드 분해는 놀에피네프린의 dose-dependency에 영향 받지 않았다.
성상세포내에서 놀에피네프린에 의해 유발된 포스포인노시타이드 분해는 IBMX나 dibutyryl cAMP에 의해 상당히 억제되었다. 알코올을 넣은 배지에서 IBMX의한 포스포인노시타이드 분해의 억제에 대한 민감도는 0mM,100mM과 500mM 알코올에 3일간 만성적으로 노출된 세포에서 모두 증가했다. 이와 같은 IBMX에 의한 억제의 민감도가 500mM농도의 알코올 배지에서 가장 컸고 0mM 농도의 배지에서 가장 낮았다.
The effect of ethanol(EtOH)in vityo on norepinephrine-stinulated phosphoinositide(PI) hydrolysis in cultured astrocytes was investigated underacute and chronic conditions stimulated by norepinephrine(NE). Using purified astrocytes from neontal rat brain, the effect of acute and chronic exposure to ethanol on the norepinephrine-prine stimulated PI breakdown was determined. Astrocytes maintained in culture in the presence and absence of ethanol were prelabeled with ^3H-inositol, and the accumulation of ^3Hinositol phosphates was measured in the persence of 10^-5M NE. ACute doses of ethanol(25-200mM) ahd little effect on NE-stimulated PI breakdown.With astrocytes chronically exposed to the same concemtrations for 7 days, significant increases in stimulated breakdown were observed beginning with concentrations of ethanol as low as 50mM. NE stimulated PI hydrolysis in astrocytes eaposed to 200mM ethanol was 3 times that measured in astrocytes grown in the absence of ethanol. When astrocytes were chronically exposed to 100 and 500 mM ethanol for various periods of time up to 7 days, it was found that significant increases in NE-stimulated PI hydrolysis occurred with exposure times as short as 4 hours. After 1 day of exposure to both EtOH concentrations, the observed increase in stimulated hydrolysis began to plateau, reaching the observed maximum values by days 3 to 5. The dose-dependency of PI hydrolysis in astrocytes chronically exposed to 100 mM EtOH was not affected even though stimulated breakdown at all concentrations of NE tested was greater than that in cells gown in the absence of EtOH. the NE-stimulated PI hydrolysis in astrocytes was markedly inhibited by acute doses of the cyclic nucleotide phosphodiesterase inhibitor, isobutyl-methylxanthine(IBMX) as wellas dibutyl cAMP. Chronic exposure to 0 mM,100 mM and 500 mM eToH resulted in an increased sensitivity of PI hydrolysis of inhibition by IBMX in the ethanol treated cultures. The sensitivity of this inhibition was greatest in the 500 mM EtoH-treated cultures and ieast in the control cultures.
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