Klebsiella가 보유한 아미노 배당체 항생제 변경효소 유전자의 분포 = Distribution of Aminoglycoside-Modifying Enzyme ANT(2") and APH(3') in Klebsiella pneumoniae
목적 :임상 검체에서 분리한 Klebsiella pneumoniae를 대상으로 kanamycin(Km)과 gentamicin(Gm)에 대한 내성양상과 아미노 배당체 항생제 변경효소인 ANT(2") 및 APH(3') 유전자의 분포를 조사하였으며, spot hybridization(SPH)과 plasmid 및 전체 DNA를 Southern hybridization을 시행한 성적을 비교하였다.
재료 및 방법 : 91주의 Klebsiella를 사용하였으며, ANT(2")유전자에 대한 probe는 pFCT3103을 AvaⅠ으로 처리한 후 310bp 크기의 절편을, APH(3')Ⅰ유전자에 대한 probe는 Tn 903을 XhoⅠ과 HindⅢ로 처리한 후 520bp 크기의 절편을 사용하였다.
결과 : 91주 중 20주가 Km과 Gm에 내성을 나타내었으며, 서울에서 분리된 균주의 내성빈도가 29.3%로 대구(11.6%)보다 높았다. 변경효소 ANT(2") prode와 hybridization 양성을 나타낸 것이 13주, APH(3') probe와 hybridization 양성을 나타낸 것이 8주였으며, 2가지 probe 모두에 양성인 것이 4주였는데, APH(3') probe와 hybridization 양성을 나타낸 8주는 모두 서울에서 분리된 균주들이었다.
결론 : 항생제 변경효소의 유전자 probe를 이용하여 hybridization함으로써 단순한 plasmid 크기의 비교나 제한효소 절단 양상의 관찰로 확인하기 힘든 유전자 내용에 대한 조사를 하여 지역간의 항생제 내성의 차이를 증명할 수 있었다.
Ninty-one strains of Klebsiella pneumoniae isolated from clinical specimens in Seoul, Taegu, and Pusan areas were evaluated for the resistance to kanamycin(Km) and gentamicin(Gm). Frequency of resistance to aminoglycoside antibiotics of strains isolated in Seoul(29.3%) was higher than those in Taegu(11.6%). Of all strains, 20 strains were resistant to Km and Gm, and harbored 1-4 plasmids ranged from 2.8 to 142 megadaltons (MDa).
ANT(2") and APH(3') probes were used to detect aminoglycoside-modifying enzymes ANT(2") and APH (3') genes of these resistant strains. By spot-hybridization, 13 strains were hybridized with both probes. All strains hybridized with APH (3') probes were the Klebsiella pneumoniae strains isolated in Seoul, and 3 strains resistant to Km were hybridized with APH (3') probe.
The sizes of plasmids hybridized with ANT(2") were variable and with APH(3') were 82MDa and 17MDa. Four strains harboring 82MDa and 17MDa plasmids were isolated from a hospital in Seoul. 82MDa plasmid of Klebsiella pneumoniae YKK103 was hybridized with both probes. Four strains were hybrdized with the ANT (2") or APH(3')probes in spot-hybridization, but not hybridized with plasmids and chromosomal DNA in Southern-hybridization.
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