Brief exposure to cycloheximide prior to electrical activation improves in vitro blastocyst development of porcine pathenogenetic and reconstructed embryos
저자
Naruse, K. (Division of Animal Science and Resources,Research Center for Transgenic Cloned Pigs,Chungnam National University) ; Quan, Y.S. (Division of Animal Science and Resources,Research Center for Transgenic Cloned Pigs,Chungnam National University) ; Kim, B.C. (Division of Animal Science and Resources,Research Center for Transgenic Cloned Pigs,Chungnam National University) ; Lee, J.H. (Division of Animal Science and Resources,Research Center for Transgenic Cloned Pigs,Chungnam National University) ; Park, C.S. (Division of Animal Science and Resources,Research Center for Transgenic Cloned Pigs,Chungnam National University) ; Jin, D.I. (Division of Animal Science and Resources,Research Center for Transgenic Cloned Pigs,Chungnam National University)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2007
작성언어
English
주제어
KDC
630
자료형태
학술저널
수록면
449-456(8쪽)
제공처
중단사유
※ 저작자의 요청에 따라 해당 논문은 원문이 제공되지 않습니다.
To investigate the effects of cycloheximide exposure before electrical activation of in vitro-matured porcine oocytes on the subsequent development of parthenogenetic embryos, cumulus-free mature oocytes were exposed to NCSU-23 medium containing cycloheximide (10μg/mL) for 0, 5, 10, 20, 30 and 60 min, activated by electrical pulse treatment (1.5 kV/cm, 100μs) and then cultured in PZM-3 for 7 days. To evaluate the effects of cycloheximide on the activation of nuclear transfer embryos, reconstructed embryos were electrically activated by two DC pulses (1.2 kV/cm, 30μs) before or after exposure to cycloheximide. The reconstructed embryos were allocated into four groups: electrical pulse treatment alone (Ele); exposure to cycloheximide for 10 min followed by electrical activation (CHX + Ele); electrical activation followed by exposure to cycloheximide for 6 h (Ele + CHX); exposure to cycloheximide for 10 min, followed by electrical activation and a further exposure to cycloheximide for 6 h (CHX + Ele + CHX). The activated reconstructed embryos were cultured in PZM-3 for 6 days. Oocytes treated with 10 min exposure to cycloheximide followed by electrical activation had a significantly higher percentage of blastocyst formation compared to control oocytes and oocytes exposed for≥30 min. In the reconstructed embryos, the blastocyst development rates of embryos exposed to cycloheximide (CHX + Ele, Ele + CHX and CHX + Ele + CHX) were significantly higher than those of the control group (Ele). Among the cycloheximide-treated groups, the CHX + Ele group had increased development rate and total blastocyst cell number, though these values were not significantly different from those observed in the other cycloheximide-treated groups. To evaluate the quality of NT embryos treated with cycloheximide, apoptosis in blastocysts was analyzed by TUNEL assay. The 10 min exposure to cycloheximide prior to electrical activation significantly reduced cell death compared with longer exposure to cycloheximide after electrical fusion. In conclusion, brief exposure to cycloheximide prior to electrical activation may increase the subsequent blastocyst development rates in porcine parthenogenetic and reconstructed embryos.
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