Re-evaluation of FDA as a vital Staining for Plant Cells = 植物細胞에 대한 生體染色劑로서의 FDA의 再評價
저자
Chung,Insun (Laboratory of Proplasmatology, Dept. of Hort. Sci. and landscape Arch., Univ. of Minesota) ; O.Y.Lee-Stadelmann (Laboratory of Proplasmatology, Dept. of Hort. Sci. and landscape Arch., Univ. of Minesota) ; So,Insup
발행기관
濟州大學校 亞熱帶農業硏究所(The Research Institute for Subtropical, Agriculture CheJu National University)
학술지명
권호사항
발행연도
1989
작성언어
English
KDC
520.4
자료형태
학술저널
수록면
49-58(10쪽)
제공처
소장기관
살아있는 세포의 활성을 검정하는데 널리 이용되고 있는 FDA와 Uranin에 대한 Urea의 투과성과 세포질 유동 그리고 세포 대사 억제물질 처리 후의 발광 정도를 조사하여 공시한 2가지 약제(FDA, Uranin)의 이용에 대한 정확한 평가를 하기 위하여 양파의 표피 조직과 완두콩의 2차 표피 조직을 대상으로 본 실험을 실시하였으며, 얻어진 결과는 다음과 같다.
1. 양파의 표피 조직을 이용한 표준 원형질 유동 속도는 7㎛/sec.이며 2시간이 경과한 후에도 속도의 변화는 없었지만, 식물 세포 대사 억제로서의 DNP와 NaN 처리에서는 시간이 경과함에 따른 모든 농도에서의 유동 속도가 감소하였다. 특히 DNP 2시간 처리후 120분이 경과되면 모든 원형질 유동이 정지됨을 볼 수 있었다.
2. FDA나 Uranin 염색에 의한 형광의 밝기 정도는 대사 억제물질이 처리된 후에도 현미경 하에서 육안으로 뚜렷이 구별할 수 없었다. 그러나 한편 형광량 측정 현미경으로 측정된 수치는 FDA가 Uranin과 비교할 때 7배나 더 밝은 것으로 나타났는데 염색약제로 희석되는 배율은 Uranin이 FDA보다 10배 높은 농도의 용액이다.
3. FDA와 Uranin의 전처리에서는 원형질 분리 현상이 기대했던 바와 같이 어떠한 영향도 주지 않았으나, Urea 투과율을 비교해보면 FDA가 100%일 때 Urnin이 35%의 비율로 투과됨을 알 수 있었다.
결론적으로 FDA는 죽은 세포를 검정하는데 적합한 약제일수는 있지만 대사적으로 활성있는 세포의 활성을 조사하는데는 부적합함을 알 수 있다. 따라서 생체 염색 방법은 식물세포의 체내 대사의 활성을 검정하는데 썩 좋은 방법이라고 할 수 없기 때문에 특히 분리된 원형질체의 활성을 검정하는데는 앞으로 누구나가 신뢰할 수 있는 새로운 기술이 요망되는 바이다.
The main purpose of this investigation was to evaluate the accurate use of FDA(Fluorescein diacetate) and Uranin(soluble fluorescein). Which were well known vital staining agent to testing the vitelity of living cell, compared by the response of urea permeability. cytoplasmic streaming and fluorecing quality after treatment of two kind of metabolic inhibitor in the protoplasm of adaxial epidermal cells of the Allium cepa bulb scale and sub-epidermal cells of the Pisum sativum.
The results obtained are as follows :
1. The speed of cytoplasmic streaming measured with onion epidermal cells in control was about 7 ㎛/sec. and did not change for 2 hours, whereas, for all concentration used, both metabolic inhibitors decreased streaming speed as time elapsed. Especially, cells treated with DNP for 120 min, almost stopped cytoplasmic streaming in 2 hours.
2. Brightness of fluorescence by FDA or Uranin staining could not be distingished by naked eyes under the microscopic observation even after inhibitor treatment. From the data measured by micro-fluometer(Zeiss epifluorescent microsoope), on the other hand, the cells stained with FDA exhibited brighter fluorescence than with uranin by 7 times although concentration of uranin in staining solution was 10 times higher than FDA.
3. As expected, plasmolysis itself was not affected with the pretreatment of FDA and Uranin : however the permeability constant increased by almost 100% and by 35% with pretreatment of FDA and Uranin respectively.
In conclusion, FDA seems not to be good to identify metabolically active cells despite its good performance for teating dead cells. However, vital stainings are not highly recommended to screening metabolically active cells.
Therefore new method should be developed for evaluating metabolic status of isolated protoplasts.
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