대장균이 보유한 Plasmid 유래 Tetracycline A, B 내성결정기의 분포 = Frequency of Tetracycline A and B Resistant Determinants in Plasmids from Escherichia coli
목적 : 현재까지 13가지 정도가 알려져 있는 Tc 내성 유전자의 대장균내의 분포를 조사하여 두면 균의 생활상 뿐아니라 발병 및 확산 경로의 추적에 지표가 결 것이다.
대상 및 방법 : 입원한 환자의 소변에서 분리한 대장균 유래 4개의 Plasmid와 건강인의 대변에서 분리한 대장균 유래 22개의 plasmid 등 총 26개의 tetracycline(Tc) 내성 plasmid를 대상으로 tetracycline A, B 내성 유전자(tet A, tet B)의 분포를 조사하였다.
결과 : EcoRI에 의한 절편들에 tet A probe를 사용한 hybridization의 결과, 5.6kb의 공통된 절편과 9.5kb의 절편에서 강한 hybridization band를 나타내는 2종류였다. tet B probe를 사용한 결과 소변에서 분리한 대장균 유래의 plasmid들에서 나타난 2.8kb 및 3.6kb 크기의 tet B 내성 유전자의 절편은 대변유래의 plasmid들에서는 관찰할 수 없었다. tet B 내성 유전자를 가진 plasmid들의 Tc 및 minocycline에 대한 최소발육저지농도가 tet A 내성 유전자를 가진 plasmid들 보다 높았다.
결론 : 건강인의 대변에서 분리한 대장균이 보유한 plasmid는 tet A를 보유한 것이 15개, tet B가 5개, tet A와 tet B의 두가지를 보유한 것이 2개로 다른 보고자들의 결과와는 달랐으며, 입원한 환자의 소변에서 분리한 대장균 유리 4개의 plasmid는 모두 tet B를 보유하고 있다.
Using restriction endonuclease analysis and DNA-hybridization techniques with the tet A and let B resistant determinant DNA probes, we have examined the frequency of these determinants among 26 tetracy-cline(Tc) resistant plasm13s.
All the 4 plasmids from 4 strains of Escherichia coli isolated from urine hybridized only with the tet B probe. Of the 22 plasmids from 22 strains of Escherichia coli isolated from healthy stool, 15(68%) plasmids hybridized with the tet A, 5(23%) plasmids with the tet B, and 2(9%) plasmids with the two probes, tet A and tet B.
The tet A probe hybridized with 5.6kb DNA fragments of 6 plasmids and 9.5kb of 2 plasmids from fecal isolates. The hybridization pattern_with the tet B probe showed more complicated than that with tet A probe. The tet B probe hybridized with 2.8kb DNA fragments of all 4 plasmids and hybridized with 3.6kb fragments of 3 plasmids from urinary isolates. But the 2.8kb and 3.6kb DNA fragments were not founded in the EcoRI treated plasmids from fecal isolates.
The transconjugant Escherichia coli strains harboring the plasmids with the tel B resistant determinants showed higher level of resistance to Tc and minocycline than those with the tet A.
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