Overproduction of Human Interleukin-2 in E. coli = E. coli로부터 사람 인터루킨-2의 대량 생산에 관하여

국문 초록 (Abstract)

본 논문에 앞서 사람 인터루킨-2(IL-2)의 cDNA 클론을 분리하였음을 보고하였다 (강성만 등, 1987). 본 보고에서는 이 cDNA클론을 이용하여 E. coli 에서 인터루킨-2를 발현시킨 결과를 보고한다. E. coli 에서 인터루킨-2를 생산하기 위하여 플라스미드 pNK2를 만들었다. 이 플라스미드에는 인터루킨-2를 코딩하는 유전자가 람다파아지의 $P_L$ 프로모터의 조절을 받도록 클로닝 되어 있다. 온도감수성 억제유전자(${\lambda}$ cIts857)를 만드는 E. coli lysogen 균주에 플라스미드 pNK2를 transformation 시켰다. 인터루킨-2의 발현을 유도하기 위하여 배양온도를 $42^{\circ}C$로 올렸을 때 세포내에 inclusion body가 형성되었음이 관찰되었다. 재조합된 유전자를 지난 E. coli에서 합성된 단백질을 SDS-폴리아크릴아마이드 젤에서 분리하였을 때 인터루킨-2의 분자량에 해당하는 15 Kd의 단백질이 관찰되었다. 이 단백질이 인터루킨-2의 활성을 지니고 있음을 인터루킨 의존성 cell line인 MTL 세포의 성장을 촉진시키는 것으로서 확인하였다. 즉 이 15 Kd 분자량의 단백질이 E. coli에서 생산된 재조합 인터루킨-2임을 보였다. 이 인터루킨-2 단백질은 E. coli 에서 생산된 총 단백질의 약 20% 에 해당하였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

A cDNA clone for human interleukin-2(IL-2) has been isolated (Kang et al., 1987). Plasmid pNK2 was constructed in order to obtain the expression of IL-2 in E. coli. In plasmid pNK2, the coding sequence was placed under the control of phage ${\lambda}$ promoter $P_L$. An E. coli ${\lambda}$ lysogenic strain carrying a temperature sensitive repressor (${\lambda}$ cIts857) was transformed with pNK2 and the expression of IL-2 cDNA was induced by raising the temperature to $42^{\circ}C$. The inclusion bodies were observed in recombinant E. coli cells after induction. When the proteins of the recombinant cells were separated on a SDS-polyacrylamide gel, a 15Kd protein band corresponding to the M.W. of IL-2 was observed. The 15Kd protein showed IL-2 activity as determined by the growth romoting effect on a IL-2 dependent cell line MTL. Therefore, it was demonstrated that the 15Kd protein was recombinant IL-2 produced in E. coli. The recombinant IL-2 represented about 20% of the total E. coli protein.