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    Carbohydrate analysis : high performance liquid chromatography and capillary electrophoresis

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    • CONTENTS
    • Preface = ⅴ
    • List of Contributors = ⅶ
    • Part I The Solute
    • Chapter 1 Preparation of Carbohydrates for Analysis by HPLC and HPCE / A.J. Mort ; M.L. Pierce = 3
    • 1.1 Introduction = 3
    • 1.2 Sample purification = 4
    • 1.2.1 Glycoproteins = 4
    • 1.2.2 Proteoglycans = 9
    • 1.2.3 Glycolipids = 11
    • 1.2.4 Lipopolysaccharides = 12
    • 1.2.5 Polysaccharides = 13
    • 1.2.5.1 Bacterial exo-polysaccharides = 13
    • 1.2.5.2 Plant cell walls = 14
    • 1.2.6 Mono- and oligosaccharides = 16
    • 1.3 Release of poly-or oligosaccharides from the sample = 17
    • 1.3.1 Glycoproteins and proteoglycans = 17
    • 1.3.1.1 Enzymic cleavage of the carbohydrate portion from glycoproteins and proteoglycans = 17
    • 1.3.1.2 Chemical cleavage of the carbohydrate portion from glycoproteins and proteoglycans = 18
    • 1.3.2 Cleavage of glycolipids = 19
    • 1.3.3 Cleavage of lipopolysaccharides = 20
    • 1.4 Further degradation for structural study = 20
    • 1.4.1 Enzymic methods = 20
    • 1.4.2 Chemical methods = 22
    • 1.4.2.1 Chemical fragmentation of poly-and oligosaccharides = 22
    • 1.4.2.2 Degradations directed to particular functional groups = 25
    • 1.5 Exchanging solvents = 26
    • 1.6 Sourccs for reference compounds = 29
    • 1.7 References = 35
    • Part II Analytical and Preparative Separations
    • Chapter 2 Reversed-Phase and Hydrophobic Interaction Chromatography of Carbohydrates and Glycoconjugates / Ziad El Rassi = 41
    • 2.1 Introduction = 41
    • 2.2 Fundamentals = 42
    • 2.2.1 RPC and HIC = 42
    • 2.2.2 Ion-pair RPC = 46
    • 2.3 Stationary phases = 47
    • 2.3.1 RPC columns = 47
    • 2.3.2 1 HIC columns = 53
    • 2.4 Mobile phases = 56
    • 2.4.1 Mobile phases commonly used in RPC = 56
    • 2.4.2 Mobile phases commonly used in HIC = 59
    • 2.5 Separation methodologies and selected applications = 61
    • 2.5.1 RPC = 61
    • 2.5.1.1 Underivatized saccharides = 61
    • 2.4.1.2 Derivatizcd carbohydrates = 65
    • 2.4.1.3 Glycopeptides = 79
    • 2.4.1.4 Giycoproteins = 83
    • 2.4.4 Ion-pair reversed-phase chromatography = 87
    • 2.4.2 HIC = 92
    • 2.5 Acknowledgments = 94
    • 2.6 References = 94
    • Chapter 3 High Performance Hydrophilic Interaction Chromatography of Carbohydrates with Polar Sorbents / Shirley C. Churms = 103
    • 3.1 Introduction = 103
    • 3.2 The chromatographic system = 104
    • 3.2.1 Polar sorbents used in HILIC = 104
    • 3.2.1.1 Microparticulate silica = 104
    • 3.2.1.2 Bonded-phase packings based on silica = 106
    • 3.2.1.3 Polymer-based packings for HILIC = 108
    • 3.2.2 Mobile phases = 109
    • 3.2.3 Operating variables = 111
    • 3.2.4 Detection systems = 112
    • 3.3 Applications of hydrophilic interaction Chromatography to carbohydrates = 114
    • 3.3.1 Adsorption and partition chromatography on silica = 114
    • 3.3.2 Partition chromatography on amine-modified silica = 120
    • 3.3.3 Partition Chromatography on silica carrying bonded polar phases = 122
    • 3.3.3.1 Amino phases = 122
    • 3.3.3.2 Amino-cyano, polyamine and amide phases = 127
    • 3.3.3.3 Hydroxylic phases = 129
    • 3.3.3.4 Novel polar phases = 130
    • 3.3.4 Partition chromatography on polymer-based packings = 131
    • 3.4 Examples of applications of hydrophilic interaction chromatography to carbohydrates = 134
    • 3.5 Conclusions = 137
    • 3.6 References = 142
    • Chapter 4 HPLC of Carbohydrates with Cation- and Anion-Exchange Silica and Resin-Based Stationary Phases / Christian G. Huber ; Gunther K. Bonn = 147
    • 4.1 Introduction = 147
    • 4.2 Cation-exchange HPLC of carbohydrates = 147
    • 4.2.1 Silica-based cation-exchange stationary phases = 147
    • 4.2.2 Polymer-based cation-exchange stationary phases = 149
    • 4.2.2.1 Some basic characteristics of polymer-based cation-exchange stationary phases = 149
    • 4.2.2.2 Cation-exchange columns, coupled in series = 152
    • 4.2.3 Separation mechanisms = 155
    • 4.2.3.1 Ion exclusion = 156
    • 4.2.3.2 Ion exclusion = 156
    • 4.2.3.3 Size exclusion = 156
    • 4.2.3.4 Ligand exchange and counter ions = 157
    • 4.2.3.5 Ion-moderated partition chromatography = 159
    • 4.2.3.6 Interactions with the sulfonate groups = 161
    • 4.2.3.7 Interactions with the support matrix = 161
    • 4.2.4 Variables affecting the liquid chromatographic separation of carbohydrates on cation exchangers = 162
    • 4.2.4.1 Particle size = 162
    • 4.2.4.2 Cross-linking = 162
    • 4.2.4.3 Column temperature = 162
    • 4.2.4.4 Eluent = 163
    • 4.3 Anion-exchange HPLC of carbohydrates = 164
    • 4.3.1 Silica-based anion-exchange stationary phases = 164
    • 4.3.2 Polymer-based anion-exchange stationary phases = 165
    • 4.3.2.1 High pH = 165
    • 4.3.2.2 Anion-exchange chromatography of carbohydrates as borate complexes = 168
    • 4.3.3 Separation mechanisms = 173
    • 4.3.3.1 Anion exchange = 173
    • 4.3.3.2 Use of borate ions in carbohydrate chromatography = 173
    • 4.4 Applications = 177
    • 4.5 References = 177
    • Chapter 5 Analysis of Glycoconjugates Using High-pH Anion-Exchange Chromatography / R. Reid Townsend = 181
    • 5.1 Introduction = 181
    • 5.2 Monosaccharide analysis = 181
    • 5.2.1 Some general aspects of HPAEC of monosaccharides = 181
    • 5.2.2 Monosaccharide analysis of glycoprotcins = 182
    • 5.2.3 Monosaccharide analysis of proteoglycans = 186
    • 5.2.4 Monosaccharide analysis of bacterial carbohydrates = 187
    • 5.2.5 Monosaccharide analysis of glycolipids = 188
    • 5.3 Oligosaccharide analysis = 188
    • 5.3.1 Some general aspects of HPAEC of oligosaccharides = 188
    • 5.3.2 N-linked oligosaccharides from glycoproteins = 192
    • 5.3.3 O-linked oligosaccharides from glycoproteins = 196
    • 5.3.4 Proteoglycan oligosaccharides = 196
    • 5.3.5 Glycosyl phosphatidylinosito! (GPI) anchor glycans = 198
    • 5.4 In-line and off-line desalting after HPAEC separations = 199
    • 5.4.1 Desalting after ppreparative HPAEC = 199
    • 5.4.2 Desalting in HPAEC-MS = 200
    • 5.5 Other important applications = 201
    • 5.5.1 Analysis of chemical and enzymatic modifications = 201
    • 5.5.2 HPAEC in medicine = 202
    • 5.6 Abbreviations = 204
    • 5.7 References = 205
    • Chapter 6 Basic Studies on Carbohydrate―Protein Interaction by High Performance Affinity Chromatography and High Performance Capillary Affinity Electrophoresis Using Lectins as Protein Models / Susumu Honda = 211
    • 6.1 Introduction = 211
    • 6.2 Use of high performance liquid chromatography = 211
    • 6.2.1 Behavior of carbohydrates on Iectin-immobilized columns = 211
    • 6.2.2 Estimation of binding constant using lectin-immobilized columns = 213
    • 6.2.3 Carbohydrate structure-affinity correlation studied on Iectin-immobilized columns = 218
    • 6.2.4 Estimation of binding constant using carbohydrate-immobilized columns = 221
    • 6.2.5 Separation of proteins on carbohydrate-immobilized columns = 222
    • 6.3 Use of high performance capillary electrophoresis = 225
    • 6.3.1 Estimation of binding constant of carbohydrate-protein interaction = 225
    • 6.3.2 Extension of the HPCE method for binding studies = 227
    • 6.3.3 Separation of carbohydrates based on interaction with proteins in HPCE = 229
    • 6.4 References = 230
    • Chapter 7 Modern Size-Exclusion Chromatography of Carbohydrates and Glycoconjugates / Shirley C. Churms = 233
    • 7.1 Introduction = 233
    • 7.1.1 Development of modern size-exclusion chromatography = 234
    • 7.2 The chromatographic system = 237
    • 7.2.1 Types of column packing for modern SEC = 237
    • 7.2.2 The mobile phase = 239
    • 7.2.3 Operating variables = 241
    • 7.2.3.1 Column variables = 242
    • 7.2.3.2 Sample variables = 243
    • 7.2.3.3 Flowrate and temperature = 244
    • 7.2.4 Detection methods = 245
    • 7.3 Applications of size -exclusion chromatography in the carbohydrate field = 247
    • 7.3.1 Analysis of oligosaccharide mixtures = 247
    • 7.3.2 Fractionation of polysaccharides and glycoconjugates = 250
    • 7.3.3 Molecular-weight distribution analysis = 258
    • 7.4 Conclusions = 261
    • 7.5 References = 262
    • Chapter 8 High Performance Capillary Electrophoresis of Carbohydrates and Glycoconjugates / Ziad El Rassi ; Wassim Nashabeh = 267
    • 8.1 Introduction = 267
    • 8.2 Overview of the fundamentals of capillary electrophoresis = 268
    • 8.2.1 Electrophoretic migration = 269
    • 8.2.2 Electroosmotic flow = 271
    • 8.2.3 Analytical parameters = 275
    • 8.2.3.1 Migration time and apparent mobility = 275
    • 8.2.3.2 Separation efficiency = 276
    • 8.2.3.3 Resolution and selectivity = 278
    • 8.2.4 Different modes of HPCE = 278
    • 8.2.4.1 Capillary zone electrophoresis = 279
    • 8.2.4.2 Capillary electrophoresis with sieving matrices = 280
    • 8.2.4.3 Micellar electrokinetic capillary chromatography = 282
    • 8.2.4.4 Capillary isoelectric focusing = 283
    • 8.2.4.5 Capillary isotachophoresis = 284
    • 8.3 The electrophoretic system = 285
    • 8.3.1 Electrolyte systems = 285
    • 8.3.1.1 Carbohydrate-borate complexes = 285
    • 8.3.1.2 Highly alkaline pH eletrolytes = 290
    • 8.3.1.3 Carbohydrate-metal cation complexes = 291
    • 8.3.2 The capillary column = 293
    • 8.3.2.1 Surface modified capillaries = 295
    • 8.3.2.1.1 Neutral coatings = 297
    • 8.3.2.1.2 Charged coatings = 305
    • 8.3.2.2 Gel-filled capillaries = 310
    • 8.4 HPCE methodologies and applications = 311
    • 8.4.1 Monosaccharides = 312
    • 8.4.2 Polysaccharides = 319
    • 8.4.2.1 Disaccharides = 319
    • 8.4.2.2 Linear oligosaccharides = 320
    • 8.4.2.3 Branched oligosaccharides = 325
    • 8.4.2.4 Polysaccharides = 329
    • 8.4.3 Glycoproteins = 329
    • 8.4.3.1 Glycoforms = 330
    • 8.4.3.2 Glycopeptide mapping = 335
    • 8.4.3.3 Glycans = 339
    • 8.4.4 Glycosaminoglycans = 343
    • 8.4.5 Glycolipids = 348
    • 8.4.6 Other glycoconjugates = 352
    • 8.5 Acknowledgments = 355
    • 8.6 References = 355
    • Chapter 9 Preparative HPLC of Carbohydrates / Kevin B. Hicks = 361
    • 9.1 Introduction = 361
    • 9.2 Equipment = 361
    • 9.2.1 Solvent delivery systems = 362
    • 9.2.2 Pre- and guard columns = 362
    • 9.2.3 Injection systems = 362
    • 9.2.4 Column hardware = 363
    • 9.2.5 Detection systems = 363
    • 9.2.6 Fraction collectors = 365
    • 9.2.7 Miscellaneous equipment = 365
    • 9.3 Stationary phases = 366
    • 9.3.1 Normal phases = 366
    • 9.3.2 Reversed phases = 367
    • 9.3.3 Cation-exchange resins = 368
    • 9.3.4 Anion-exchange phases = 370
    • 9.3.5 Miscellaneous phases = 371
    • 9.4 General guidelines for preparative HPLC of carbohydrates = 371
    • 9.4.1 Obtaining adequate resolution (R) = 372
    • 9.4.2 Selection of column size = 372
    • 9.4.3 Selection of column flow-rate = 373
    • 9.5 Specific preparative HPLC techniques for various classes of carbohydrates = 373
    • 9.5.1 Neutral monosaccharides and derivatives = 373
    • 9.5.2 Acidic and basic monosaccharides and derivatives = 374
    • 9.5.3 Neutral oligosaccharides = 375
    • 9.5.4 Basic and acidic oligosaccharides = 378
    • 9.5.5 Glycopeptides and other glycoconjugates = 381
    • 9.6 Bibliographic information = 381
    • 9.7 References = 383
    • Part III The Detection
    • Chapter 10 Pulsed Electrochemical Detection of Carbohydrates at Gold Electrodes Following Liquid Chromatographic Separation / Dennis C. Johnson ; William R. Lacourse = 391
    • 10.1 Introduction = 391
    • 10.2 Voltammetric basis of puised electrochemical detection = 393
    • 10.2.1 Residual response at Au electrodes = 393
    • 10.2.2 Glucose response at Au electrodes = 394
    • 10.2.3 Mechanistic aspects of PED response = 396
    • 10.3 Design and optimization of PED waveforms = 397
    • 10.3.1 Historical significance of pulsed cleaning = 397
    • 10.3.2 General waveform design = 398
    • 10.3.3 Optimization of waveform parameters = 399
    • 10.3.4 Carbohydrate response revisited = 402
    • 10.4 Representative LC-PED results for carbohydrates = 403
    • 10.4.1 Isoeratic separations = 403
    • 10.4.2 Gradient separations = 404
    • 10.4.3 Enzymatic post-column reactors = 410
    • 10.4.4 Selection of mobile-phase additives = 411
    • 10.4.5 Other considerations = 412
    • 10.5 Other applications of LC-PED = 413
    • 10.5.1 Simple n-alcohols and glycols = 413
    • 10.5.2 Aminoalcohols = 414
    • 10.5.3 Amino acids = 416
    • 10.5.4 Organosulfur compounds = 418
    • 10.6 Future improvements = 419
    • 10.6.1 Capillary electrophoresis = 419
    • 10.6.2 Faster waveforms = 420
    • 10.6.2 Indirect delection = 421
    • 10.7 Conclusions = 422
    • 10.8 Acknowledgements = 422
    • 10.9 Appendices = 423
    • 10.10 References = 427
    • Chapter 11 On-Column Refractive Index Detection of Carbohydrates Separated by HPLC and CE / Alfredo E. Bruno ; Beat Krattiger = 431
    • 11.1 Introduction = 431
    • 11.2 Refractive index of mixtures = 432
    • 11.3 Instrumentation = 433
    • 11.3.1 The deflection method = 433
    • 11.3.2 The off-axis method = 435
    • 11.3.3 The hologram method = 439
    • 11.4 Concluding remarks = 444
    • 11.5 References = 446
    • Chapter 12 Mass Spectrometry of Carbohydrates and Glycoconjugates / C.A. Settineri ; A.L. Burlingame = 447
    • 12.1 Introduction = 447
    • 12.2 Techniques and strategies = 449
    • 12.2.1 Ionization methods = 449
    • 12.2.1.1 Electron ionization (EI) = 449
    • 12.2.1.2 Field desorption (FD) = 450
    • 12.2.1.3 Chemical ionization (CI) = 450
    • 12.2.1.4 Liquid secondaryion mass spectrometry (ESIMS) and fast-atom bombardment (FAB) = 451
    • 12.2.1.5 Electrospray ionization (ESI) = 452
    • 12.2.1.6 Matrix-assisted laser desorption ionization (MALDI) = 453
    • 12.2.2 Instrumentation = 453
    • 12.2.2.1 Sector = 454
    • 12.2.2.2 Quadrupole = 455
    • 12.2.2.3 Time of flight (TOF) = 456
    • 12.2.2.4 Collision-induced dissociation (CID) = 457
    • 12.2.3 Sample inlet systems = 458
    • 12.2.3.1 Gas-liquid chromatography (GLC) = 458
    • 12.2.3.2 Static probe = 458
    • 12.2.3.3 Liquid chromatography (LC) = 458
    • 12.3 Protein glycosylation = 459
    • 12.3.1 Asparagine-linked glycosylation = 463
    • 12.3.1.1 Determination of structural class = 463
    • 12.3.1.2 Identification at specific attachment sites = 470
    • 12.3.1.3 Determination of the sequence, branching and linkages = 475
    • 12.3.2 Serine / threonine-linked glycosylation = 483
    • 12.3.2.1 Identification at specific attachment sites = 484
    • 12.3.2.2 Determination of sequence, branching and linkages = 486
    • 12.3.3 Carboxy-terminal glycosyl-phosphatidylinositol (GPI) anchors = 486
    • 12.4 Glycosphingolipids = 491
    • 12.5 Lipo-peptido-glycans and miscellaneous classes = 493
    • 12.5.1 Gram negative bacterial lipopolysaccharides = 493
    • 12.5.2 Glycans and glycopeptidolipids from Mycobacteria = 496
    • 12.5.2.1 Lipoarabinomannan (LAM) = 496
    • 12.5.2.2 Mycobacterial glycopeptidolipids (GPL) = 499
    • 12.5.3 O-Linked carbohydrates found on EGF modules = 500
    • 12.5.3.1 $$(Xyl\alpha 1→3)Xyl\alpha 1→3Gic \beta 1→$$O-Ser modifications = 501
    • 12.5.3.2 $$(NeuAc\alpha 2→6Gal\beta 1→4GlcNAc\beta 1→3)Fuc\alpha 1→$$O-Ser/Thrmodifications = 501
    • 12.5.4 N-Linked glycans containing N-acetylgalactosamine and sulphated-N-acetyl-galactosamine = 502
    • 12.6 Conclusions and future challenges = 504
    • 12.7 Acknowledgements = 505
    • 12.8 Appendix = 505
    • 12.8.1 Derivatization strategies = 505
    • 12.8.2 Linkage analysis methods = 506
    • 12.9 References = 507
    • Chapter 13 Evaporative Light Scattering Detection of Carbohydrates in HPLC / M. Dreux ; M. Lafosse = 515
    • 13.1 Introduction = 515
    • 13.2 Evaporative light scattering detector―principle, detector technology and characteristics = 516
    • 13.2.1 Nebulization = 517
    • 13.2.2 Vaporization = 519
    • 13.2.3 Measurement of the scattered light intensity―quantitative analysis = 520
    • 13.2.4 Characteristic properties of the detector = 523
    • 13.2.5 Which detector should be used with a chromatographic analysis of a given mixture = 524
    • 13.3 Analysis of carbohydrates and carbohydrate derivatives = 525
    • 13.3.1 Separation-detection dependency = 525
    • 13.3.1.1 Eluents incompatible with ELSD characteristics = 525
    • 13.3.1.2 Volatile eluents = 525
    • 13.3.1.3 ELSD quality of a chromatographic eluent = 526
    • 13.3.1.4 Stability of stationary phase = 526
    • 13.3.1.5 Automatic sugar analysis in a complex mixture = 528
    • 13.3.2 Isocratic and gradient HPLC with polar and apolar stationary phases = 528
    • 13.3.2.1 Diol and polyol stationary phases = 528
    • 13.3.2.2 Aminopropyl-bonded silicas = 531
    • 13.3.2.3 Apolar stationary phases = 532
    • 13.3.2.4 Quantitative determination = 532
    • 13.3.2.5 Carbohydrate derivatives = 536
    • 13.4 Conclusion and future prospects = 536
    • 13.5 References = 539
    • Chapter 14 Chiroptical Detectors for HPLC of Carbohydrates / Neil Purdie = 541
    • 14.1 Introduction = 541
    • 14.2 History of development = 542
    • 14.3 Bases behind chiroptical detectors = 543
    • 14.4 Instrumentation = 545
    • 14.4.1 General descriptions = 545
    • 14.4.1.1 Polarimelers = 545
    • 14.4.1.2 Spectropolarimeters = 546
    • 14.4.2 Modifications for chromatographic detection = 546
    • 14.4.3 Calibrations = 547
    • 14.4.3.1 Instruments = 547
    • 14.4.3.2 Compounds = 548
    • 14.5 Applications = 548
    • 14.5.1 Bulk systems = 549
    • 14.5.2 Bulk systems with induced chirality = 549
    • 14.5.3 LC systems = 550
    • 14.5.4 LC systems with induced chirality = 553
    • 14.6 Summary = 553
    • 14.7 Rcferences = 553
    • Chapter 15 Pre- and Post-Column Detection-Oriented Derivatization Techniques in HPLC of Carbohydrate / Sumihiro Hase = 555
    • 15.1 Introduction and scope = 555
    • 15.2 Carbonyl derivatization = 558
    • 15.2.1 Tritium labeling = 558
    • 15.2.2 Carbonyl derivatization into imines (Schiff bases) or glycosylamines = 559
    • 15.2.3 Formation of amines by reductive amination = 561
    • 15.3 Hydroxy derivatization = 564
    • 15.4 Miscellaneous = 566
    • 15.5 Convertible derivatization = 568
    • 15.6 Post-column derivatization = 570
    • 15.7 Acknowledgements = 571
    • 15.8 References = 571
    • Chapter 16 Post-Column Enzyme Reactors for the HPLC Determination of Carbohydrates / L.J. Nagels ; P.C. Maes = 577
    • 16.1 Introduction = 577
    • 16.2 Immobilization of enzymes in reactors = 577
    • 16.3 Applications of post-column enzyme reactors in liquid chromatography of carbohydrates = 581
    • 16.3.1 Detection methods suited for combination with post-column enzyme reactors = 581
    • 16.3.1.1 Detectors combined with oxidase reactors = 587
    • 16.3.1.2 Detectors combined with dehydrogenase reactors = 588
    • 16.3.2 Chromatographic determination of mono- and disaccharides using dehydro-genase-based enzyme reactors = 588
    • 16.3.3 Chromatographic determination of mono- and disaccharides using oxidase-based enzyme reactors = 590
    • 16.3.4 Determination of oligo-and polysaccharides = 594
    • 16.3.5 Determination of carbohydrate containing molecules = 599
    • 16.4 Reactor kinetics = 599
    • 16.5 References = 603
    • Chapter 17 Other Direct and Indirect Detection Methods of Carbohydrates in HPLC and HPCE / Ziad El Rassi ; Joel T. Smith = 607
    • 17.1 Introduction = 607
    • 17.2 UV detection in HPLC and HPCE = 607
    • 17.2.1 UV detection of underivatized carbohydrates = 607
    • 17.2.2 Indirect detection of underivatized carbohydrates in HPCE = 610
    • 17.2.2.1 Principles of indirect detection = 610
    • 17.2.2.2 Examples of indirect UV detection of carbohydrates in HPCE = 613
    • 17.2.3 UV detection of derivatized carbohydrates in HPCE = 615
    • 17.3 Fluorescence detection in HPCE = 618
    • 17.3.1 Principles of fluorescence detection = 618
    • 17.3.2 Instrumentation for fluorescence detection in HPCE = 620
    • 17.3.3 Indirect detection of underivatized carbohydrates using LIF = 622
    • 17.3.4 Fluorescence detection of derivatized carbohydrates = 624
    • 17.4 Other miscellaneous detection in HPLC and HPCE = 627
    • 17.4.1 Conductometric detection of carbohydrates in HPLC = 627
    • 17.4.2 NMR as a detector for HPLC = 629
    • 17.4.3 Detection of radiolabeled carbohydrates = 631
    • 17.4.4 Constant-potential amperometric detection in HPLC and HPCE = 633
    • 17.5 Conclusions = 636
    • 17.6 Acknowledgments = 637
    • 17.7 References = 637
    • Subject Index = 641
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              학술연구정보서비스 이용약관 (2017년 1월 1일 ~ 현재 적용)

              1. 제 1 장 총칙

                1. 제 1 조 (목적)

                  • 이 약관은 한국교육학술정보원(이하 "교육정보원"라 함)이 제공하는 학술연구정보서비스의 웹사이트(이하 "서비스" 라함)의 이용에 관한 조건 및 절차와 기타 필요한 사항을 규정하는 것을 목적으로 합니다.
                2. 제 2 조 (약관의 효력과 변경)

                  1. ① 이 약관은 서비스 메뉴에 게시하여 공시함으로써 효력을 발생합니다.
                  2. ② 교육정보원은 합리적 사유가 발생한 경우에는 이 약관을 변경할 수 있으며, 약관을 변경한 경우에는 지체없이 "공지사항"을 통해 공시합니다.
                  3. ③ 이용자는 변경된 약관사항에 동의하지 않으면, 언제나 서비스 이용을 중단하고 이용계약을 해지할 수 있습니다.
                3. 제 3 조 (약관외 준칙)

                  • 이 약관에 명시되지 않은 사항은 관계 법령에 규정 되어있을 경우 그 규정에 따르며, 그렇지 않은 경우에는 일반적인 관례에 따릅니다.
                4. 제 4 조 (용어의 정의)

                  이 약관에서 사용하는 용어의 정의는 다음과 같습니다.
                  1. ① 이용자 : 교육정보원과 이용계약을 체결한 자
                  2. ② 이용자번호(ID) : 이용자 식별과 이용자의 서비스 이용을 위하여 이용계약 체결시 이용자의 선택에 의하여 교육정보원이 부여하는 문자와 숫자의 조합
                  3. ③ 비밀번호 : 이용자 자신의 비밀을 보호하기 위하여 이용자 자신이 설정한 문자와 숫자의 조합
                  4. ④ 단말기 : 서비스 제공을 받기 위해 이용자가 설치한 개인용 컴퓨터 및 모뎀 등의 기기
                  5. ⑤ 서비스 이용 : 이용자가 단말기를 이용하여 교육정보원의 주전산기에 접속하여 교육정보원이 제공하는 정보를 이용하는 것
                  6. ⑥ 이용계약 : 서비스를 제공받기 위하여 이 약관으로 교육정보원과 이용자간의 체결하는 계약을 말함
                  7. ⑦ 마일리지 : RISS 서비스 중 마일리지 적립 가능한 서비스를 이용한 이용자에게 지급되며, RISS가 제공하는 특정 디지털 콘텐츠를 구입하는 데 사용하도록 만들어진 포인트
              2. 제 2 장 서비스 이용 계약

                1. 제 5 조 (이용계약의 성립)

                  1. ① 이용계약은 이용자의 이용신청에 대한 교육정보원의 이용 승낙에 의하여 성립됩니다.
                  2. ② 제 1항의 규정에 의해 이용자가 이용 신청을 할 때에는 교육정보원이 이용자 관리시 필요로 하는
                    사항을 전자적방식(교육정보원의 컴퓨터 등 정보처리 장치에 접속하여 데이터를 입력하는 것을 말합니다)
                    이나 서면으로 하여야 합니다.
                  3. ③ 이용계약은 이용자번호 단위로 체결하며, 체결단위는 1 이용자번호 이상이어야 합니다.
                  4. ④ 서비스의 대량이용 등 특별한 서비스 이용에 관한 계약은 별도의 계약으로 합니다.
                2. 제 6 조 (이용신청)

                  1. ① 서비스를 이용하고자 하는 자는 교육정보원이 지정한 양식에 따라 온라인신청을 이용하여 가입 신청을 해야 합니다.
                  2. ② 이용신청자가 14세 미만인자일 경우에는 친권자(부모, 법정대리인 등)의 동의를 얻어 이용신청을 하여야 합니다.
                3. 제 7 조 (이용계약 승낙의 유보)

                  1. ① 교육정보원은 다음 각 호에 해당하는 경우에는 이용계약의 승낙을 유보할 수 있습니다.
                    1. 1. 설비에 여유가 없는 경우
                    2. 2. 기술상에 지장이 있는 경우
                    3. 3. 이용계약을 신청한 사람이 14세 미만인 자로 친권자의 동의를 득하지 않았을 경우
                    4. 4. 기타 교육정보원이 서비스의 효율적인 운영 등을 위하여 필요하다고 인정되는 경우
                  2. ② 교육정보원은 다음 각 호에 해당하는 이용계약 신청에 대하여는 이를 거절할 수 있습니다.
                    1. 1. 다른 사람의 명의를 사용하여 이용신청을 하였을 때
                    2. 2. 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재하였을 때
                4. 제 8 조 (계약사항의 변경)

                  이용자는 다음 사항을 변경하고자 하는 경우 서비스에 접속하여 서비스 내의 기능을 이용하여 변경할 수 있습니다.
                  1. ① 성명 및 생년월일, 신분, 이메일
                  2. ② 비밀번호
                  3. ③ 자료신청 / 기관회원서비스 권한설정을 위한 이용자정보
                  4. ④ 전화번호 등 개인 연락처
                  5. ⑤ 기타 교육정보원이 인정하는 경미한 사항
              3. 제 3 장 서비스의 이용

                1. 제 9 조 (서비스 이용시간)

                  • 서비스의 이용 시간은 교육정보원의 업무 및 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간(00:00-24:00)을 원칙으로 합니다. 다만 정기점검등의 필요로 교육정보원이 정한 날이나 시간은 그러하지 아니합니다.
                2. 제 10 조 (이용자번호 등)

                  1. ① 이용자번호 및 비밀번호에 대한 모든 관리책임은 이용자에게 있습니다.
                  2. ② 명백한 사유가 있는 경우를 제외하고는 이용자가 이용자번호를 공유, 양도 또는 변경할 수 없습니다.
                  3. ③ 이용자에게 부여된 이용자번호에 의하여 발생되는 서비스 이용상의 과실 또는 제3자에 의한 부정사용 등에 대한 모든 책임은 이용자에게 있습니다.
                3. 제 11 조 (서비스 이용의 제한 및 이용계약의 해지)

                  1. ① 이용자가 서비스 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 온라인으로 교육정보원에 해지신청을 하여야 합니다.
                  2. ② 교육정보원은 이용자가 다음 각 호에 해당하는 경우 사전통지 없이 이용계약을 해지하거나 전부 또는 일부의 서비스 제공을 중지할 수 있습니다.
                    1. 1. 타인의 이용자번호를 사용한 경우
                    2. 2. 다량의 정보를 전송하여 서비스의 안정적 운영을 방해하는 경우
                    3. 3. 수신자의 의사에 반하는 광고성 정보, 전자우편을 전송하는 경우
                    4. 4. 정보통신설비의 오작동이나 정보 등의 파괴를 유발하는 컴퓨터 바이러스 프로그램등을 유포하는 경우
                    5. 5. 정보통신윤리위원회로부터의 이용제한 요구 대상인 경우
                    6. 6. 선거관리위원회의 유권해석 상의 불법선거운동을 하는 경우
                    7. 7. 서비스를 이용하여 얻은 정보를 교육정보원의 동의 없이 상업적으로 이용하는 경우
                    8. 8. 비실명 이용자번호로 가입되어 있는 경우
                    9. 9. 일정기간 이상 서비스에 로그인하지 않거나 개인정보 수집․이용에 대한 재동의를 하지 않은 경우
                  3. ③ 전항의 규정에 의하여 이용자의 이용을 제한하는 경우와 제한의 종류 및 기간 등 구체적인 기준은 교육정보원의 공지, 서비스 이용안내, 개인정보처리방침 등에서 별도로 정하는 바에 의합니다.
                  4. ④ 해지 처리된 이용자의 정보는 법령의 규정에 의하여 보존할 필요성이 있는 경우를 제외하고 지체 없이 파기합니다.
                  5. ⑤ 해지 처리된 이용자번호의 경우, 재사용이 불가능합니다.
                4. 제 12 조 (이용자 게시물의 삭제 및 서비스 이용 제한)

                  1. ① 교육정보원은 서비스용 설비의 용량에 여유가 없다고 판단되는 경우 필요에 따라 이용자가 게재 또는 등록한 내용물을 삭제할 수 있습니다.
                  2. ② 교육정보원은 서비스용 설비의 용량에 여유가 없다고 판단되는 경우 이용자의 서비스 이용을 부분적으로 제한할 수 있습니다.
                  3. ③ 제 1 항 및 제 2 항의 경우에는 당해 사항을 사전에 온라인을 통해서 공지합니다.
                  4. ④ 교육정보원은 이용자가 게재 또는 등록하는 서비스내의 내용물이 다음 각호에 해당한다고 판단되는 경우에 이용자에게 사전 통지 없이 삭제할 수 있습니다.
                    1. 1. 다른 이용자 또는 제 3자를 비방하거나 중상모략으로 명예를 손상시키는 경우
                    2. 2. 공공질서 및 미풍양속에 위반되는 내용의 정보, 문장, 도형 등을 유포하는 경우
                    3. 3. 반국가적, 반사회적, 범죄적 행위와 결부된다고 판단되는 경우
                    4. 4. 다른 이용자 또는 제3자의 저작권 등 기타 권리를 침해하는 경우
                    5. 5. 게시 기간이 규정된 기간을 초과한 경우
                    6. 6. 이용자의 조작 미숙이나 광고목적으로 동일한 내용의 게시물을 10회 이상 반복하여 등록하였을 경우
                    7. 7. 기타 관계 법령에 위배된다고 판단되는 경우
                5. 제 13 조 (서비스 제공의 중지 및 제한)

                  1. ① 교육정보원은 다음 각 호에 해당하는 경우 서비스 제공을 중지할 수 있습니다.
                    1. 1. 서비스용 설비의 보수 또는 공사로 인한 부득이한 경우
                    2. 2. 전기통신사업법에 규정된 기간통신사업자가 전기통신 서비스를 중지했을 때
                  2. ② 교육정보원은 국가비상사태, 서비스 설비의 장애 또는 서비스 이용의 폭주 등으로 서비스 이용에 지장이 있는 때에는 서비스 제공을 중지하거나 제한할 수 있습니다.
                6. 제 14 조 (교육정보원의 의무)

                  1. ① 교육정보원은 교육정보원에 설치된 서비스용 설비를 지속적이고 안정적인 서비스 제공에 적합하도록 유지하여야 하며 서비스용 설비에 장애가 발생하거나 또는 그 설비가 못쓰게 된 경우 그 설비를 수리하거나 복구합니다.
                  2. ② 교육정보원은 서비스 내용의 변경 또는 추가사항이 있는 경우 그 사항을 온라인을 통해 서비스 화면에 공지합니다.
                7. 제 15 조 (개인정보보호)

                  1. ① 교육정보원은 공공기관의 개인정보보호에 관한 법률, 정보통신이용촉진등에 관한 법률 등 관계법령에 따라 이용신청시 제공받는 이용자의 개인정보 및 서비스 이용중 생성되는 개인정보를 보호하여야 합니다.
                  2. ② 교육정보원의 개인정보보호에 관한 관리책임자는 학술연구정보서비스 이용자 관리담당 부서장(학술정보본부)이며, 주소 및 연락처는 대구광역시 동구 동내로 64(동내동 1119) KERIS빌딩, 전화번호 054-714-0114번, 전자메일 privacy@keris.or.kr 입니다. 개인정보 관리책임자의 성명은 별도로 공지하거나 서비스 안내에 게시합니다.
                  3. ③ 교육정보원은 개인정보를 이용고객의 별도의 동의 없이 제3자에게 제공하지 않습니다. 다만, 다음 각 호의 경우는 이용고객의 별도 동의 없이 제3자에게 이용 고객의 개인정보를 제공할 수 있습니다.
                    1. 1. 수사상의 목적에 따른 수사기관의 서면 요구가 있는 경우에 수사협조의 목적으로 국가 수사 기관에 성명, 주소 등 신상정보를 제공하는 경우
                    2. 2. 신용정보의 이용 및 보호에 관한 법률, 전기통신관련법률 등 법률에 특별한 규정이 있는 경우
                    3. 3. 통계작성, 학술연구 또는 시장조사를 위하여 필요한 경우로서 특정 개인을 식별할 수 없는 형태로 제공하는 경우
                  4. ④ 이용자는 언제나 자신의 개인정보를 열람할 수 있으며, 스스로 오류를 수정할 수 있습니다. 열람 및 수정은 원칙적으로 이용신청과 동일한 방법으로 하며, 자세한 방법은 공지, 이용안내에 정한 바에 따릅니다.
                  5. ⑤ 이용자는 언제나 이용계약을 해지함으로써 개인정보의 수집 및 이용에 대한 동의, 목적 외 사용에 대한 별도 동의, 제3자 제공에 대한 별도 동의를 철회할 수 있습니다. 해지의 방법은 이 약관에서 별도로 규정한 바에 따릅니다.
                8. 제 16 조 (이용자의 의무)

                  1. ① 이용자는 서비스를 이용할 때 다음 각 호의 행위를 하지 않아야 합니다.
                    1. 1. 다른 이용자의 이용자번호를 부정하게 사용하는 행위
                    2. 2. 서비스를 이용하여 얻은 정보를 교육정보원의 사전승낙없이 이용자의 이용이외의 목적으로 복제하거나 이를 출판, 방송 등에 사용하거나 제3자에게 제공하는 행위
                    3. 3. 다른 이용자 또는 제3자를 비방하거나 중상모략으로 명예를 손상하는 행위
                    4. 4. 공공질서 및 미풍양속에 위배되는 내용의 정보, 문장, 도형 등을 타인에게 유포하는 행위
                    5. 5. 반국가적, 반사회적, 범죄적 행위와 결부된다고 판단되는 행위
                    6. 6. 다른 이용자 또는 제3자의 저작권등 기타 권리를 침해하는 행위
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                9. 제 17 조 (광고의 게재)

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              4. 제 4 장 서비스 이용 요금

                1. 제 18 조 (이용요금)

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              5. 제 5 장 마일리지 정책

                1. 제 19 조 (마일리지 정책의 변경)

                  1. ① RISS 마일리지는 2017년 1월부로 모두 소멸되었습니다.
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              6. 제 6 장 저작권

                1. 제 20 조 (게재된 자료에 대한 권리)

                  서비스에 게재된 자료에 대한 권리는 다음 각 호와 같습니다.
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              7. 제 7 장 이의 신청 및 손해배상 청구 금지

                1. 제 21 조 (이의신청금지)

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              8. 부칙

                이 약관은 2000년 6월 1일부터 시행합니다.
              9. 부칙(개정 2005. 5. 31)

                이 약관은 2005년 5월 31일부터 시행합니다.
              10. 부칙(개정 2010. 1. 1)

                이 약관은 2010년 1월 1일부터 시행합니다.
              11. 부칙(개정 2010. 4 1)

                이 약관은 2010년 4월 1일부터 시행합니다.
              12. 부칙(개정 2017. 1 1)

                이 약관은 2017년 1월 1일부터 시행합니다.

              학술연구정보서비스 개인정보처리방침

              Ver 8.6 (2023년 1월 31일 ~ )

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              마. 정보주체의 권리행사 요구 거절 시 불복을 위한 이의제기 절차는 다음과 같습니다.
                   1) 해당 부서에서 열람 등 요구에 대한 연기 또는 거절 시 요구 받은 날로부터 10일 이내에 정당한 사유
                      및 이의제기 방법 등을 통지
                   2) 해당 부서에서 정보주체의 이의제기 신청 및 접수(서면, 유선, 이메일 등)하여 개인정보보호 담당자가
                      내용 확인
                   3) 개인정보관리책임자가 처리결과에 대한 최종 검토
                   4) 해당부서에서 정보주체에게 처리결과 통보
              *. [교육부 개인정보 보호지침 별지 제1호] 개인정보 (열람, 정정·삭제, 처리정지) 요구서
              *. [교육부 개인정보 보호지침 별지 제2호] 위임장
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              나. 개인정보 취급 담당자의 최소화 및 교육
                   - 개인정보를 취급하는 분야별 담당자를 지정․운영
                   - 한국교육학술정보원의 내부 관리 지침에 따른 교육 실시
              다. 개인정보에 대한 접근 제한
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                   개인정보에 대한 접근통제 실시
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              라. 접속기록의 보관 및 위변조 방지
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                   - 물리적 보관장소에 대한 출입통제, CCTV 설치․운영 절차를 수립, 운영
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