유전자 조작에 의한 Lactobacillus acidophilus 의 항생제 저항성균주의 개선에 관한 연구 = Antibiotic Resistant Strain Improvement of Lactobacillus acidophilus by Genetic Manipulation
A new strain of L. acidophilus which had been electroporated with an antibiotic resistant plasmid, pGKV259, was to tolerate much higher concentrations of antibiotics with decrease in the ability of acid production and reproduction function than the intact cells in MRS broth medium at 37℃.
Freeze-dried concentrates of both transformants and intact cells of L. acidophilus were prepared in lyophilization media which containing six cryoprotecive agents and examined for their ability to afford protection to cultures against freezing, freeze drying and storage. The organisms lost considerable viability during storage. Monosodium glutamate afforded greatest protection to both transformants and intact cells during the period of storage at room temperature. The lyophilized transformants even after 12weeks of storage still showed much the same antibiotic tolerance as non freeze-dried cells.
항생물질 저항성 plasmid pGKV259가 electroporation기법에 의하여 숙주균 Lactobacillus acidophilus에 전이되었음이 plasmid분리 및 항생배지 성장에서 확인되었다. 변형된 Lactobacillus acidophilus는 숙주균주보다 훨씬 높은 항생물질 농도의 MRS배지에서 성장하였으나 산생성 능력과 생장기능이 저하하였다.
숙주균 Lactobacillus acidophilus 및 변형균의 냉동건조는 여섯 종류의 냉동보호제를 첨가한 냉동건조배지에서 시행하여 냉동, 냉동건조, 그리고 저장에 따라 각 냉동보호제의 능력을 조사하였다. 균들은 저장하는 동안 상당히 생존력을 상실하였으며, 숙주균 및 변형균을 상온에 저장하는 동안 monosodium glutamate가 가장 좋은 보호제로 나타났다. 냉동건조된 변형균 역시 냉동건조 하기 전과 마찬가지로 항생제에 대한 내성을 보였다.
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