Purification and Characterization of the PcrA Helicase in Enterococcus faecium JC1
저자
발행사항
진주 : The Graduate School of the Gyeongsang National University, 2005
학위논문사항
학위논문(석사)-- The Graduate School of the Gyeongsang National University : 응용생명과학부 2005. 2
발행연도
2005
작성언어
영어
발행국(도시)
경상남도
형태사항
Ⅵ, 39 p. ; 26 cm
일반주기명
지도교수: Bahk, Jeong Dong
소장기관
Enterococcus faecium은 그람 양성 세균으로 장내 기원의 병원성 세균이다. E. faecium의 plasmid복제 양식에 대한 연구를 통하여 병원성 세균에 대한 약품 개발에 중요한 생화학적 정보를 얻을 수 있을 것으로 기대하고 있다.
모든 유전 정보는 genome의 duplex DNA에 설계되어 있어서 정보에 대한 접근은 duplex DNA가 일시적으로 풀어질 때 가능하다. 수많은 효소 중 이러한 목적으로 진화된 효소로서 “DNA helicase” 가 알려져 있다. DNA helicase는 세포 내에 보편적으로 존재하는 분자형 motor 단백질로서, duplex DNA를 ATP의 가수분해 에너지를 이용하여 효과적으로 풀어 냄으로써 복제, 수선, 재조합과 전사를 포함하는 핵산 대사에서 중요한 역할을 수행한다. 이들은 duplex helix 사이의 수소 결합을 끊고 DNA 가닥에 붙어 단일 방향으로 이동하는 translocase로서 또한 DNA 의존적인 ATPase로서 역할을 하게 되며, 잘 보존된 helicase motif가 DNA를 풀어나가는 발동기 역할을 한다. DNA helicase는 공통적으로 nucleic acid binding, NTP binding 과 hydrolysis, 3’→5’ 또는 5’→3’의 진행 방향성을 가지며 duplex DNA를 ss DNA로 풀어나가는 unwinding activity의 특성을 갖는다.
본 연구에서는 중요한 병원성 세균 중 하나인 E. faecium에 존재하는 plasmid를 분리, 선택하고, 그것의 복제과정 중 개시 단계에 있어서의 역할을 담당하는 중요한 효소인 PcrA의 생화학적인 특성에 대한 연구를 수행하고자 하였다. Database search를 통해 그람 양성세균인Bacillus subtilis 와 Staphylococcus aureus 의pcrA 유전자와 상응하는 유전자를sequence homology를 기반으로 하여 E. faecium의 genome으로부터 분리, 동정 하였다. pcrA 유전자는 PCR을 통한 amplification에 의해 분리 하였고, E. coli에 cloning 하였다. PcrA 단백질은 amino-terminal 말단을 his6로 fusion된 것 (His6-PcrA)으로 분리하였으며, template DNA로 single strand (ss) DNA를 사용하면 이 단백질의 ATPase 활성이 자극 되었다. 흥미롭게도, PcrA의 5’→3’ helicase 활성은 3’→5’ 활성보다 더 강한 것으로 나타났다. 더욱이, PcrA는 5’ 말단에 hairpin구조와 ss region을 포함하는 DNA기질을 사용 하였을 때 최고의 helicase 활성을 보여주었다. 이는 helicase activity가 그들 DNA기질의 특이 구조에 매우 의존적임을 의미하고, 이와 같이PcrA가 in vivo 에서 template DNA의 특이 구조를 식별 함으로서 세포 내 서로 다른 다양한 생리과정(복제, 수선, 재조합 등)에 선택적으로 이용될 수 있다는 매우 중요한 단서를 제공한다.
서지정보 내보내기(Export)
닫기소장기관 정보
닫기권호소장정보
닫기오류접수
닫기오류 접수 확인
닫기음성서비스 신청
닫기음성서비스 신청 확인
닫기이용약관
닫기학술연구정보서비스 이용약관 (2017년 1월 1일 ~ 현재 적용)
학술연구정보서비스(이하 RISS)는 정보주체의 자유와 권리 보호를 위해 「개인정보 보호법」 및 관계 법령이 정한 바를 준수하여, 적법하게 개인정보를 처리하고 안전하게 관리하고 있습니다. 이에 「개인정보 보호법」 제30조에 따라 정보주체에게 개인정보 처리에 관한 절차 및 기준을 안내하고, 이와 관련한 고충을 신속하고 원활하게 처리할 수 있도록 하기 위하여 다음과 같이 개인정보 처리방침을 수립·공개합니다.
주요 개인정보 처리 표시(라벨링)
목 차
3년
또는 회원탈퇴시까지5년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한3년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한2년
이상(개인정보보호위원회 : 개인정보의 안전성 확보조치 기준)개인정보파일의 명칭 | 운영근거 / 처리목적 | 개인정보파일에 기록되는 개인정보의 항목 | 보유기간 | |
---|---|---|---|---|
학술연구정보서비스 이용자 가입정보 파일 | 한국교육학술정보원법 | 필수 | ID, 비밀번호, 성명, 생년월일, 신분(직업구분), 이메일, 소속분야, 웹진메일 수신동의 여부 | 3년 또는 탈퇴시 |
선택 | 소속기관명, 소속도서관명, 학과/부서명, 학번/직원번호, 휴대전화, 주소 |
구분 | 담당자 | 연락처 |
---|---|---|
KERIS 개인정보 보호책임자 | 정보보호본부 김태우 | - 이메일 : lsy@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0439 - 팩스번호 : 053-714-0195 |
KERIS 개인정보 보호담당자 | 개인정보보호부 이상엽 | |
RISS 개인정보 보호책임자 | 대학학술본부 장금연 | - 이메일 : giltizen@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0149 - 팩스번호 : 053-714-0194 |
RISS 개인정보 보호담당자 | 학술진흥부 길원진 |
자동로그아웃 안내
닫기인증오류 안내
닫기귀하께서는 휴면계정 전환 후 1년동안 회원정보 수집 및 이용에 대한
재동의를 하지 않으신 관계로 개인정보가 삭제되었습니다.
(참조 : RISS 이용약관 및 개인정보처리방침)
신규회원으로 가입하여 이용 부탁 드리며, 추가 문의는 고객센터로 연락 바랍니다.
- 기존 아이디 재사용 불가
휴면계정 안내
RISS는 [표준개인정보 보호지침]에 따라 2년을 주기로 개인정보 수집·이용에 관하여 (재)동의를 받고 있으며, (재)동의를 하지 않을 경우, 휴면계정으로 전환됩니다.
(※ 휴면계정은 원문이용 및 복사/대출 서비스를 이용할 수 없습니다.)
휴면계정으로 전환된 후 1년간 회원정보 수집·이용에 대한 재동의를 하지 않을 경우, RISS에서 자동탈퇴 및 개인정보가 삭제처리 됩니다.
고객센터 1599-3122
ARS번호+1번(회원가입 및 정보수정)