Evaluation of cell viability assays in Human induced-pluripotent stem cells: Compare the 2D and 3D cell culture models
저자
NamJu Kim ; Ji-Hyun Bang ; Hee Yi ; Moon Her ; Hyun-Ok Ku ; Byung-Suk Jeon
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2021
작성언어
English
주제어
자료형태
학술저널
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수록면
219-219(1쪽)
제공처
In vitro Cell viability assay is one of the most fundamental tests in different form of cell culture, which tests the number of healthy cells in a sample. Also, cell viability assay has become an integral aspect of drug-induced toxicity study because it is a convenient, cost-effective, and predictive means of characterizing the toxic potential of drugs. Recently, utilization of induced-pluripotent stem cells (iPSc) and multistep hepatic differentiation recapitulating in vivo hepatic development opens the new era in medicine and pharmaceutical industry. The aim of this study was to compare the in vitro cytotoxicity assay and the ability to detect early cytotoxic events in 2D and 3D cultures of induced pluripotent stem cells. Human iPSC (QIA7) was established from adipose tissue-derived stromal cells from our previous study. These cells were mechanically passaged using Dispase (STEMCELL Technologies, Canada) and maintained on a Matrigel (hESC-qualified matrix, Corning) coated plate with mTeSR1 medium (STEMCELL Technologies). The 2D culture cells were seeded at the density of 1.5 x 104 cells/well on 96-well matrigel-coated plates and the cells were incubated at 37°C in a 5% CO2 humidified incubator. The 3D cells were cultured under the same conditions as 2D cells, and the cells were seeded on 96-well U-bottom matrigel non-coated plate. After 24 hours post-seeding, cells were treated with Acetaminophen (AAP, 1, 3, 10, 30 mM) for 24 hours. Following to the drugs treated, cytotoxicity was determined with the 4-[3(4-iodophenyl)-2-(4-nitrophenyl)-2H-5-tetrazolio]-1,3-benzene disulfonate (Tetrazolium salts, WST-1), 7-Hydroxy-10- oxidophenoxazin-10-ium-3-one (Resazurin, Alamarblue) and Cell Titer-Glo<SUP>®</SUP> luminescence assay (Promega, Fitchburg, WI). Overall, it was concluded that the best way to evaluate the potential cytotoxicity of hepatotoxicants is CellTiter and WST-1 assays. CellTiter and WST-1 assay showed effect of reducing cell viability in 2D and 3D cultures depending on the concentration of the drug. Alamarblue assays showed significant results in 2D culture, but the reagent did not respond well in 3D cultures.
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