Purification and Characterization of Arylsulfatase A from Rat Uterus = 쥐의 자궁에서 아릴썰파타아제 A의 분리 및 그 성질에 관한 연구
저자
황인환 ; 양철학 ; Hwang, In-Hwan ; Yang, Chul-Hak
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1983
작성언어
English
자료형태
학술저널
수록면
13-26(14쪽)
제공처
$(NH_4)_2\;SO_4$, 분획분리, DEAE-셀룰로즈 크로마토그라피, Sephadex G-200젤 여과법, Con A-Sepharose 흡착크로마토그라피 및 Sephadex G-200젤 여과법등을 이용하여 쥐의 자궁에서 아럴썰파타아제 A를 거의 순수한 상태로 정제하였다. 아랄쎌파타아제 A는 DEAE-셀룰로즈 column에 의하여 아릴썰파타아제 B와 Bm으로부터 분리되어졌고, DEAE-셀룰로즈 column으로 부터 0.2M NaCl 선형 농도증가에 의해서 흘러나왔다. 이 효소는 마지막 단계의 회수율이 8%였으며, 207배 정제되어졌으나 Disc-폴리아크릴아마이드 젤 영동법에 의하여 단일 단백질로 정제되지는 않았다. 아릴쎌파다아제 A는 비정상적인 시간에 따른 활동도 곡선을 나다냈다. 아릴썰파타아제 A는 $37^{\circ}C$에서 10 분동안의 반응에서는 pH 적정점은 pH 5.2와 pH 5.6이었는데, 60분 동안의 반응에서는 pH 5.0과 pH 5.6으로 바뀌어졌다. ${SO_4}^{2-}$, ${SO_3}^{2-}$ 및 ${PO_4}^{2-}$는 강한 방해제로서 작용하며 그들의 Ki값은 각각 $4.3{\times}10^{-3}M$, $6.6{\times}10^{-5}M$ 및 $3.0{\times}10^{-5}M$이었다. $P_2{O_7}^{2-}$와 $Cu^{2+}$ 이온은 아릴쎌파다아제 A 활성도를 방해하였으나 $Mn^{2+}$, $Co^{2+}$, $Ca^{2+}$와 ascorbic acid는 활성도를 오히려 증가시켰다. 반면에 $Ag^+$와 $Cl^-$이온은 효소의 활동에 전혀 영향을 미치지 않았다. 효소의 활성도는 $60^{\circ}C$까지 온도의 증가에 따라 계속 증가되 었으며 70분 동안 $60^{\circ}C$에서 82%의 활동도를 유지하였다. Sephadex G-200젤 여과법에 의하여 아랄쎌파타아제 A의 분자량은 pH 5.0 과 pH 7.2에서 모두 120,000 daltons으로 나타났다.
더보기Arylsulfatase A (aryl sulfate sulfohydrolase; E.C. 3.1.6.1) from rat uterus was highly purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography, Sephadex G-200 gel filtration. Conconavalin A-Sepharose affinity chramatography, and second gel filtration on Sephadex G-200. Arylsulfatase A was separated from arylsulfatases B and Bm by DEAE-cellulose column where arylsulfatase A was eluted at 0.2 M of NaCl linear gradient. The enzyme was purified 207-fold with 8% recovery, but disc polyacrylamide-gel electrophoresis showed that the purified preparation was not homogeneous. Arylsulfatase A showed the anomalous time-activity relationship. The $K_m$ and $V_{max}$ were 6.8 mM and 15.6 nmol/min, respectively. Arylsulfatase A had two pH optima at pH 5.2 and 5.6 for 10 min incubation time, and these optima shifted to pH 5.0 and 5.6 with incubation time of 60 min. ${SO_4}^{2-}$, ${SO_3}^{2-}$, and ${PO_4}^{2-}$ were strong inhibitors with Ki values of $4.3{\times}10^{-3}M$, $6.6{\times}10^{-5}M$, and $3.0{\times}10^{-5}M$, respectively. Pyrophosphate and $Cu^{2+}$ ion inhibited arylsulfatase A but $Mn^{2+}$, $Co^{2+}$, $Ca^{2+}$, and ascorbic acid activated the enzyme activity. Siver and $Cl^-$ ion did not affect the enzyme activity. Enzyme activity was increased to $60^{\circ}C$ for 10 min and thermally stable at $60^{\circ}C$ for 70 min with 82% of activity. By Sephadex G-200 gel filtration the molecular weight of arylsulfatase A was 120,000 at both pH 5.0 and 7.2.
더보기서지정보 내보내기(Export)
닫기소장기관 정보
닫기권호소장정보
닫기오류접수
닫기오류 접수 확인
닫기음성서비스 신청
닫기음성서비스 신청 확인
닫기이용약관
닫기학술연구정보서비스 이용약관 (2017년 1월 1일 ~ 현재 적용)
학술연구정보서비스(이하 RISS)는 정보주체의 자유와 권리 보호를 위해 「개인정보 보호법」 및 관계 법령이 정한 바를 준수하여, 적법하게 개인정보를 처리하고 안전하게 관리하고 있습니다. 이에 「개인정보 보호법」 제30조에 따라 정보주체에게 개인정보 처리에 관한 절차 및 기준을 안내하고, 이와 관련한 고충을 신속하고 원활하게 처리할 수 있도록 하기 위하여 다음과 같이 개인정보 처리방침을 수립·공개합니다.
주요 개인정보 처리 표시(라벨링)
목 차
3년
또는 회원탈퇴시까지5년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한3년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한2년
이상(개인정보보호위원회 : 개인정보의 안전성 확보조치 기준)개인정보파일의 명칭 | 운영근거 / 처리목적 | 개인정보파일에 기록되는 개인정보의 항목 | 보유기간 | |
---|---|---|---|---|
학술연구정보서비스 이용자 가입정보 파일 | 한국교육학술정보원법 | 필수 | ID, 비밀번호, 성명, 생년월일, 신분(직업구분), 이메일, 소속분야, 웹진메일 수신동의 여부 | 3년 또는 탈퇴시 |
선택 | 소속기관명, 소속도서관명, 학과/부서명, 학번/직원번호, 휴대전화, 주소 |
구분 | 담당자 | 연락처 |
---|---|---|
KERIS 개인정보 보호책임자 | 정보보호본부 김태우 | - 이메일 : lsy@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0439 - 팩스번호 : 053-714-0195 |
KERIS 개인정보 보호담당자 | 개인정보보호부 이상엽 | |
RISS 개인정보 보호책임자 | 대학학술본부 장금연 | - 이메일 : giltizen@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0149 - 팩스번호 : 053-714-0194 |
RISS 개인정보 보호담당자 | 학술진흥부 길원진 |
자동로그아웃 안내
닫기인증오류 안내
닫기귀하께서는 휴면계정 전환 후 1년동안 회원정보 수집 및 이용에 대한
재동의를 하지 않으신 관계로 개인정보가 삭제되었습니다.
(참조 : RISS 이용약관 및 개인정보처리방침)
신규회원으로 가입하여 이용 부탁 드리며, 추가 문의는 고객센터로 연락 바랍니다.
- 기존 아이디 재사용 불가
휴면계정 안내
RISS는 [표준개인정보 보호지침]에 따라 2년을 주기로 개인정보 수집·이용에 관하여 (재)동의를 받고 있으며, (재)동의를 하지 않을 경우, 휴면계정으로 전환됩니다.
(※ 휴면계정은 원문이용 및 복사/대출 서비스를 이용할 수 없습니다.)
휴면계정으로 전환된 후 1년간 회원정보 수집·이용에 대한 재동의를 하지 않을 경우, RISS에서 자동탈퇴 및 개인정보가 삭제처리 됩니다.
고객센터 1599-3122
ARS번호+1번(회원가입 및 정보수정)