임파세포분화항원 CD5의 C-말단부위의 유전자 클로닝 및 세포내 CD5-특이적 결합단백질의 규명 = Cloning of the Gene for C-terminal Region of Lymphocyte Differentiation Antigen CD5 and Identification of a Protein Interacts with CD5
A Iymphocyte surface marker, CD5 is expressed in pan-T cells and certain B cell sub- populations such as Bla cells which secretes natural autoantibodies and malignant B cells as in chronic Iymphocytic leukemia (B-CLL). For the reasons that the cell-type specific expression patterns and that the immunoreceptor tyrosine-based activation motif (ITAM) containing cytosolic region of the molecule, CD5 was considered to be involved in a probable cellular signal transductions for the Iymphocyte activations. In order to shed light on the cellular signal transdcutions for the Iymphocyte activation. In order to shed light on the cellular function of the CD5, the gene for cytosolic region of the molecule(cd5_(cyt)) was cloned and the intracellular protein that interacts with CD5 cytosolic region(CD5_(cyt)) was investigated using yeast two hybrid system. Among them a clone, 27-2, harvested 1.2 kb inserts. Partial deoxyribonucleic acids sequences of 120 bp were read out from clone 27-2, preserntly. Amino acid sequences deduced from the DNA sequences revealed that it might be a G-protein like milecule which is unknown from human but showed 61% of homology with the ADP-rebosylation factor l-directed GTPase from C. elegans under the BLAST comparisons. Therefore, it might be suggersted that the CD5 mediated signal transduction may be a G protein-dependent pathway.
더보기임파세포특이 항원인 CD5는 T cell의 경우 모든 sub-population에서 발현되고 있으나 B cell의 경우에는 natural autoantibody를 생산하는 Bla cell population 및 자가면역항체 생성 B cells, B cell Iymphoma 등의 특수한 minor population에서만 발현되는 것으로 밝혀졌다. 이러한 세포 특이적 발현 양상과 함께 94개의 amino acids로 이루어진 CD5의 cytoplasmic region에는 immunoreceptor tyrosine-based activation motif (ITAM)가 존재하여 임파 세포의 세포 내 신호전달에 중요한 역할을 할 것으로 예상되고 있다. 본 연구에서는 CD5분자를 매개한 면역담당세포의 신호전달체계를 규명하고 더 나아가 CD5의 세포 내 기능을 분자수준에서 규명하기 위하여 CD5의 cytoplasmic domain에 해당되는 유전자를 분리하였고 이와 CD5와 세포내 상호작용을 이루는 CD5특이적 결합 단백질을 yeast two hybrid system을 이용하여 검색하였다. Selected clone중에서27-2로 명명한 clone의 insert 크기는 1.2 kb였으며, 확인한 유전자서열은 129 염기로 단백질 1차 구조를 유추하여 BLAST로 검색한 결과 C. elegans의 G protein의 하나인 ADP-ribosylation factor 1-directed GTPase와 61%의 homology를 보였으나, human에서는 대응하는 단백질이 보고되지는 않았다. 세포내 CD5-특이적 결합단백질로 GTPase로 예상되는 새로운 단백질을 밝힘으로 CD5의 signal transduction이 G protein-dependent pathway일 가능성을 제시하였다.
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