토양으로 부터 분리한 방선균 KYR 26균주가 생산하는 항생물질의 분리 정제 = Purification of Antibiontics Produced by Soil Actinomycetes KYR26 strain.
1. 작용 범위가 넓고 부작용이 적은 의약용 항생물질을 screening하기 위한 목적으로 전남 지역 토양시료로 부터 방선균을 분리하여 항균활성이 우수한 방선균을 선별하여 KYR 26이라 명명 하였다.
2. KYR 26균주의 최적 배양배지는 Modified SMM배지 이었으며, 항생물질 생산은 배양 3일째에 최대의 수율을 나타내었다.
3. KYR 26균주가 생산하는 항생 물질은 Ion exchange chromatography, Adsorption chromatography, LH-20 coluom chromatography, Precipitation과 Silica column chromatography 과정을 통하여 항생물질 A, B를 분리정제 하였다.
4. 분리 정제된 항생 물질 A와 B는 TLC에서 각각 Rf치 0.53, 0.48에서 단일 spot로 나타났고,HPLC에서 항생물질 A와B는 각각 2.94, 7.66의 retention time을 보였으며 모두 98%의 순도를 보였다.
5. 분리 정제된 항생 물질 A와 B의 UV spectrum을 조사한 결과 항생물질 A,B는 모두 270nm에서 최대흡수 파장을 나타내었다.
현재 최종 분리 정재된 항생물질 A와 B의 구조 규명을 위하여 IR, ^1H-NMR, ^3C-NMR, Mass spectroscopy에 관한 실험이 진행중에 있다.
Soil Actinomycetes were isolated from soil samples which were collected from the 100 sites of Cheon-nam areas. Isolated strains were tested for the production of antibiotics in various fermentation media using 4 strains of antibiotic sensitive test microorganisms. One strain which has excellent antibacterial activities was selected, and named to KYR 26. From culture broth of KYR 26 strain, two antibiotics were obtained through Ion Exchange Chromatography, Adsorption Chromatography, Gel Filtration Chromatography, Silica gel column chromatography and Crystalization. The finally purified two antibiotics exhibited single spot on the TLC chromatogram,and about 98 % purity on the profile of HPLC Chromatogram. Two antibiotics exhibited Rf 0.53 and 0.48 each on TLC with developing solvent system (MeOH:CHCl_3). The UV spectrum of isolated antibiotics exhibited a characteristic absorption maximum at 270nm.
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