SCOPUS
KCI등재
유전자조작, 균주분리 대장균을 이용한 Akt/PKB Protein Kinase의 발현 및 활성화 = Expression and Activation of Akt/PKB Protein Kinase using Escherichia coli
저자
발행기관
학술지명
한국미생물·생명공학회지 (Korean Journal of Microbiology and Biotechnology)
권호사항
발행연도
2009
작성언어
-주제어
KDC
400
등재정보
SCOPUS,KCI등재
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
105-109(5쪽)
제공처
소장기관
Among signal transduction systems by protein phosphorylation Akt/PKB protein kinase which is one of serine/threonine kinases, is known to regulate the survival and death of the cell and glucose metabolism. Thus, Akt/PKB protein kinase has been used as one of the target proteins to find anti-cancer agents from natural products. In this study, human Akt/PKB protein kinase was expressed in Escherichia coli expression system for the mass production. Human Akt/PKB protein kinase expressed in E. coli formed inclusion body under the general condition. However, most of the expressed protein was solubilized under the culture temperature at 27℃ and 0.01-0.09 mM of IPTG for induction of the protein expression. The expressed protein was purified using Ni(2+)-NTA agarose column and confirmed by using anti-Akt antibody. Subsequently, the purified human Akt/PKB protein kinase was activated by in vitro phosphorylation using cellular extract containing kinases. The activated protein was confirmed to phosphorylate the specific fluorescent peptide specially designed as the artificial substrate for Akt/PKB protein kinase.
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