수산화칼슘 기반 근관내 약제용 용매가 Enterococcus faecalis 바이오필름에 미치는 영향
저자
발행사항
전주: 전북대학교 일반대학원, 2020
학위논문사항
학위논문(석사)-- 전북대학교 일반대학원: 치의과학과 2020. 2
발행연도
2020
작성언어
한국어
주제어
발행국(도시)
전북특별자치도
기타서명
Effect of various vehicles for calcium hydroxide-based intracanal medicament on Enterococcus faecalis biofilms
형태사항
iii, 19 p.: 삽화; 26 cm
일반주기명
전북대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
지도교수: 민경산
참고문헌 : p. 11-13
UCI식별코드
I804:45011-000000050967
소장기관
연구목적: 본 연구는 근관내 약제에 사용된 다양한 용매의 Enterococcus faecalis (E. faecalis) 바이오필름에 대한 항균효과를 조사하는 것을 목적으로 한다.
실험방법: 연구를 위한 표준화된 근관모델은 소의 중절치(bovine central incisors)를 사용하였다. 수산화칼슘 기반 근관내 약제를 합성하기 위해 사용된 용매는 다음과 같다; diethylene-glycol monoethyl ether (DEGEE), dimethyl sulfoxide(DMSO), N-methyl-2-pyrrolidone (NMP), polyethylene glycol (PEG) 및 propylene glycol (PG)를 사용하였고, 용매의 항균효과를 알아보기 위해 colony forming unit (CFU) 측정, extracellular DNA (eDNA) 측정, 공초점 레이저 주사현미경(confocal laser scanning microscope; CLSM) imaging assay를 실시하였다. 또한 전계방사형 주사전자현미경(field emission scanning electron microscope; FE-SEM)을 통하여 E. faecalis의 바이오필름 형성을 관찰하였다. 아울러 용매의 독성이 세포에 미치는 영향을 알아보기 위해 L929 세포주를 이용한 MTT 분석을 통해 세포생존율을 평가하였고, 일원배치 분산분석(one-way analysis of variance; ANOVA)으로 통계처리 후, Tukey's test로 사후검정 하였다.
결과: NMP를 함유한 약제를 처리한 시편이 가장 낮은 CFU 수치와 eDNA level을 보였다. CLSM 분석에서도 NMP 실험군이 바이오 볼륨 및 두께 그리고 extracellular polymeric substance(EPS)에서 가장 적은 수치를 나타냈다. 또한 NMP를 함유한 약제를 처리한 E. faecalis 바이오필름은 다른 실험군에 비해 약화된 matrix와 더 많은 pore가 관찰되었다.
결론: NMP의 낮은 생체적합성과 높은 pH에도 불구하고, E. faecalis 바이오필름에 대한 NMP의 항균효과는 다른 용매보다 우수하였다.
Objective: The aim of the study was to investigate the antibacterial effects of different vehicles used in a calcium hydroxide-based intracanal medicament on Enterococcus faecalis (E. faecalis) and their biocompatibility on fibroblast cells, L929.
Materials and methods: Bovine central incisors were obtained to make standardized root canal models for the study. The calcium hydroxide-based intracanal medicaments were produced by using diethylene-glycol monoethyl ether (DEGEE), dimethyl sulfoxide (DMSO), N-methyl-2-pyrrolidone (NMP), polyethylene glycol (PEG) and propylene glycol (PG). The antibacterial effect of the tested materials was performed through colony forming units (CFU) assay, extracellular DNA (eDNA) measurement, and confocal laser scanning microscopy (CLSM) imaging assay. Field emission scanning electron microscopy (FE-SEM) was used to observe E. faecalis biofilm. The cytotoxic effect of the vehicles on the L929 cell line was evaluated by using MTT analysis. The data were analyzed by using the one-way analysis of variance and followed by Tukey’s test (P < 0.05).
Results: Specimens treated with an NMP contained paste had the lowest CFU number and eDNA level (P < 0.05). CLSM analysis showed that NMP had the least bio-volume and mean thickness of bacteria and extracellular polymeric substance (EPS) (P < 0.05). E. faecalis biofilm treated with an NMP containing paste was a more porous and broken matrix compared to the others. The cell viability of the DEGEE and NMP-based paste showed the lower cell viability compared to other materials (P < 0.05).
Conclusion: Even though NMP showed low biocompatibility with its high pH, its antibacterial effect against E. faecalis was significantly better than other vehicles.
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