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중합효소연쇄반응법을 이용한 삼일열말라리아(Plasmodium vivax)의 감염모기 확인 = Vector Determination of Tertian Malaria (Plasmodium vivax) by Polymerase Chain Reaction
최근 삼일열말라리아가 재유행하고 있는 경기도 북부지역에서 채집한 얼룩날개모기속(Anopheles)모기의 삼일열원충 감염 여부를 중합효소연쇄반응(Polymerase chain reaction)법으로 확인하여 매개모기의 종을 재확인하고 분포 양상을 조사하였다. 1996년 8월29일부터 9월 19일까지 철원군 소재 군부대 GOP와 대마리, 연천군의 석장리, 원당리, 동중리, 현가리, 파주시의 장파리, 마정리, 법원리, 백련리, 조산리, 파주리 그리고 동두천시의 생연동에서 드라이아이스법으로 19시부터 다음날 아침 07시까지 모기를 채집하였다. 채집된 5,615마리의 Anopheles속 모기를 동정한 결과 An. sinensis가 4,866마리 (86.7%), An. yatsusiroensis가 561마리 (9.9%), An. pullus가 112마리 (1.9%), An. sineroides가 58마리 (1.0%), An. lesteri가 12마리 (0.2%), An. koreicus가 6마리 (0.1%)였다. 채집지별로 Anopheles 속 모기의 genomic DNA를 분리하였고, 삼일열원충 특이 유전자인 circumsporozoite protein유전자를 두쌍의 primer를 이용하여 nested-PCR법으로 증폭하였다. 그 결과 파주시의 백련리와 장파리에서 채집된 An. sinensis에서 약 870 bp크기의 PCR 증폭산물을 확인할 수 있었다. 이 PCR 증폭산물을 Pv210과 Pv247에 대한 oligonucleotideprobe를 사용하여 DNA hybridization한 결과, 두 지역에서 채집된 모기들은 Plasmodium vivax Pv210 type에 감염된 것으로 밝혀졌다.
더보기The vivax malaria was re-emerged in northern part of Kyonggi-do, rescently. Anopheline mosquitoes were analyzed with polymerase chain reactions to determine what kind of mosquito is the main vector for malaria transmission. The Anophetine mosquitoes were collected from 29th Aug. to 19th Sep., 1996, in epidemic areas. The areas were GOP of XX corps and Taema-ri in Chorwon-gun, Seokjang-ri, Wondang-ri, Tongiung-ri and Hyunga-ri in Yonchon-gun, Changpa-ri, Majeong-ri, Popwon-ri, Paekryun-ri, Chosan-ri and Paju-ri in Paju-shi, Saengyon-dong in Tongduchon-shi. Mosquitoes were collected by dry ice method from 19:00 to 07:00 on next morning. Total 5,615 Anophetine mosquitoes were collected and identified into species based on taxonomic criteria. As a results of classification, 4,866 An. sinensis (86.7%), 561 An. yatsusiroensis (9.9%), 112 An. pullus (1.9%), 58 An. sineroides (1.0%), 12 An. lesteri (0.2%), and 6 An. koreicux (0.1%) were identified. Anophetine mosquito DNA was extracted and then amplified the circumsporozoite protein gene, which is the specific gene of Plasmodium vivax, with nested-PCR method. PCR products (about 870 bp) were observed with DNA samples of mosquitoes collected in Changpa-ri and Paekryun-ri. As the results of DNA hybridization, the amplified PCR products belonged to Plasmodium vivax Pv210 type.
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