Development of Human cDNA Microarray Chip = 인간의 Cdna Microarray Chip 개발

국문 초록 (Abstract)

생화학 및 분자생물학의 발전을 통하여 새로운 유전자 발현 분석 기술이 개발되었다. 이것은 고밀도로 집적된 microscopic array를 말하는 것으로서 유리판 위에 인간의 cDNA를 고밀도로 부착시켜 놓은 것이라고 할 수 있다. 이 논문에서는 1953개의 인간 cDNA가 포함된 high density microarray chip의 제작과정을 설명하고자 한다. 유리판 위에 spot된 cDNA는 경북대학교 의과대학 기질세포 유전자은행으로부터 제공받았으며 유전자는 5‘ 말단부위가 amine으로 변형을 시킨 primer(T3, T7)를 이용하여 PCR을 통하여 얻었다. 유전자는 DNA microarrayer(Cartesian Tech)를 사용하여 유리판 위에 spotting 하였다. 3.24cm^(2)의 공간 위에 부착된 유전자는 두 가지 색깔의 형광색으로 만들어진 sample과 hybridization 시킬 것이며 두 가지 조건에서 나타나는 유전자의 발현 양상을 비교하게 될 것이다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Advances in biochemistry and molecular biology have enabled the development of a new gene expression assay. This 'chip-based' approach utilizes microscopic arrays of cDNAs printed on a glass as high-density hybridization targets. We have made high-density microarray chip containing 1953 human cDNAs. The human cDNA clones that spotted on a glass were acquired from a medical college of Kyungpook Univ. The inserts were amplified by PCR using primers(T3, T7) containing an amino modification on the 5' ends. The PCR products were array products were arrayed using a high-density DNA microarrayer(Cartesian Tech). These 3.24 cm^(2) chips can be used to quantitatively monitor differential expression of the cognate human genes using a highly sensitive two-color hybridization assay. The hybridization of fluorescently labeled samples to the array were detected and quantitated with a laser confocal scanning microscope. Parallel gene analysis with microarrays provides a rapid and efficient method for large scale human gene discovery. Mass produced microarrays provide a new tool for genome expression analysis that may revolutionize genetic dissection, drug discovery and human disease diagnostics.