핵전이에 의한 Aspergillus oryzae var. oryzae와 Penicillium chrysogenum의 잡종에서 Alkaline protease 고생산균주의 개량
A. oryzae var. oryzae와 P. chrysogenum간의 alkaline protease 우수 생성 좋간형질전환체를 획득하고 유전분석을 통하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 핵전이를 위한 원형질체 형성 및 재생 조건에서는 Novozym 234의 농도 1%, 삼투안정제는 0.6M KCI 그리고 효소의 처리 시간은 189분으로 나타났다. 또한 핵전이에 의한 형질전화의 빈도는 1.3~3.8 x 10^(-4)으로 비교적 낮은 편이었다. 유전적 안정성, conidia의 크기, DNA 함량의 측정 그리고 핵염색 결과 형질전환체의 핵형은 aneuploid로 추정되었고, 형질전환체의 alkaline protease 활성은 모균주와 비교하여 1.1~2.2 배 증가하였다.
Interspecific hybrids between Aspergillus oryzae var. oryzae and Penicillium chrysogenum(Tyr^(-)), hyperlipolytic enzyme-producing fungi, were obtained by nuclear transfer technique. Optical contitions for formation of intergeneric hybrids were investigated Maximum production of protoplasts were obtained by 1% Novozym 234 at 30! for 3 hours and the most effective osmotic stabilizers for the isolation of protoplasts were 0.6M KCI. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were 1.3 10^(-3)∼2.8×10^(-3). From the observation of genetic stability, conidial size, DNA content, and nuclear stain, it was suggested that their karyotypes are aneuploid. The hybrids showed 1.1∼2.2 fold higher alkaline protease activities than parental strains, It was strong1y supported by results of this study that nuclear transfer technique is efficient in the formation of intergeneric hybrids fusion and is very useful for the improvement of strains.
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