SCOPUS
KCI등재
SCIE
흰쥐 간세포의 동결 및 해동 조건 = Freezing and Tbawing Conditioras of Rat Heqatocytes
저자
홍성표 (포천중문의대 내과학교실) ; 김경철 (포천중문의대 내과학교실) ; 정은미 (포천중문의대 내과학교실) ; 황성규 (포천중문의대 내과학교실) ; 박필원 (포천중문의대 내과학교실) ; 오성욱 (포천중문의대 내과학교실) ; 임규성 (포천중문의대 내과학교실) ; 권창일 (포천중문의대 내과학교실)
발행기관
학술지명
Clinical and Molecular Hepatology(대한간학회지)(Clinical and Molecular Hepatology)
권호사항
발행연도
2001
작성언어
Korean
KDC
510
등재정보
SCOPUS,KCI등재,SCIE
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
308-314(7쪽)
제공처
Background/Aims: During cryopreservation of hepatocytes, a dramatic loss in cell number, viability and differentiated cell function is usually inevitable because hepatocytes are very sensitive to stress during freezing and thawing. We tried to investigate the optimal cryopreservation conditions of hepatocytes including the constituents of the freezing medium and freezing rate. Mcthods: Isolated hepatocytes were cryopreserved in media containing 10% glycerol or dimethyl sulfoxide (DMSO) of variable concentration. Different freezing procedures (stepwise, rapid, and programmed with or without shock cooling) were used and they were stored in a liquid nitrogen tank. After rapid thawing at 39°C, followed by dilution and removal of the cryopreservative, the ability of the hepatocytes to exclude trypan blue dye (TB) was evaluated. Hepatocytes were fractionated through a Nycodenz density gradient centrifugation (DGC) to eliminate dead cells. Cells were plated on dishes coated with type I collagen. Results: Cell viabiity of hepatocytes recovered from cryopreservation was maintained better using 10, 15, and 20% DMSO as a cryopreservative and programmed cell freezer with shock cooling. After Nycodenz DGC a hepatocyte fraction highly enriched in viable cells could be taken between 11% and 30%. In culture, cryopreserved hepatocytes exhibited a morphology with epithelial characteristics. Conclusions- These results suggest that rate-adjusted progrananed freezing with shock cooling and 10, 15 and 20% DMSO increased the viability of cryopreserved hepatocytes. The hepatocyte fraction highly enriched in viable cells could be taken using Nycodenz DGC. In order to establish a bank of hepatocytes for hepatocyte transplantations and artificial livers a more improved method is nevertheless necessary to increase the viability of hepatocytes after cryopreservation. (Korean J Hepatol 2001;7:308-314)
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