배양중인 계배간충직세포의 protein kinase C 활성도 분석 = Role of Protein Kinase C during the chondrogenesis in Vitro
To investigate the relationship between protein kinse C (PKC) and chondrogenesis, PKC activity was assayed in cultures of stage 23/24 chick limb bud mesenchymal cells under various conditions. PKC activities of cytosolic and particulate fractions were low in 1 day cultured cells. As chondrogenesis proceeds, cytosolic PKC activity increased more than 2-fold, while that of the particulate fraction increased only slightly. Three days' treatment of cultures with PMA(5×10 exp (-8)M) inhibited chondrogenesis judged by the accumlation of Alcian blue bound to the extracellular matrix and depressed PKC activity in cytosolic fraction. When cells were grown for 3 days in control medium after 3 days' treatment with PMA, chondrogenesis resumed and PKC activity recovered to normal values. PKC activity in cultures plated at low density (5×10 exp (6) cells/ml) or that in PMA treated cells. On the other hand, staurosporine promoted chondrgenesis without affecting PKC activity. Furthermore, reversal of PMA's inhibitory effect on chondrogenesis by staurosporine was not accompanied by recovery of PKC activity. These data indicate that increases in PKC activity is closely related to chondrogenesis and that PMA inhibits chondrogenesis by depressing PKC. However, staurosporine's enchancing effect of chondrogenesis is not related of PKC activity.
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