Studies on Histones from Sracoma 180 Ascites Tumor Cells. Biosynthesis and Phosphorylation = Sarcoma 180 복수암의 Histone의 생합성 및 인산화에 관한 연구
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1971
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English
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학술저널
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77-99(23쪽)
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1. Histone fractions, f1, f2b, f2a2, f3 and f2a1 were isolated from Sarcoma 180 ascites tumor cells and characterized by acrylamide disc electrophoresis, phosphorylation in vitro and amino acid analysis. 2. The rate of incorporation in vivo of L-Iysine-$^{14}C$ into different histone fractions isolated from tumor cells and tumor-bearing liver of mice has been determined for the study of biosynthesis. The fraction f2b from the tumor cells showed the highest incorporation rate, whereas the fraction f2a2 exhibited the lowest. No marked differences in the incorporation rate of the lysine-$^{14}C$ into the fractions f3, fl and f2a1 were observed 3. In the experiments with tumor-bearing mouse liver, the rate of lysine-$^{14}C$ into the histone fractions fl, f2a1, f2a2 and f3 was very similar to each other. On the other hand, the rate of incorporation of lysine-$^{14}C$ into the fraction f2b was approximately twice as high as that into other fractions. 4. The incorporation rate of lysine-$^{14}C$ into histone fractions isolated from the tumor cells was higher (approximately 1.5 times) than that into liver histone fractions. 5. Amino acid composition of the whole histone from the tumor cells is very similar to the published values for calf liver and kidney and rat liver. It is also similar to that for calf thymus except for the lower content of basic amino acids and lower ratio of basic residues. The whole histone fractions isolated from the tumor cells contained much less proline and methionine and much more glutamic acid, as compared with that isolated from others. Amino acid composition of the whole histone isolated from tumor-bearing liver of mice showed higher content of basic amino acids and lower content of acidic residues. 6. The relative amounts of incorporation in vitro of $^{32}P$ into different histone fractions from cells have been determined. The incorporation of $^{32}P$ into histone fractions f2b was the greatest, while almost no radioactivities were observed in the fractions f2a1 and f2a2. The incorporation of the radioisotopes into remaining fractions was variable from one fraction to another, the incorporation rate into the fraction fl being higher than that into the f3 fraction. 7. Evidence was obtained confirming the presence of phosphoserine in histone fractions f2b, f1 and f3 from cells. It was shown that a greater amount of $^{32}P$ was incorporated into the fraction f2b. being present in the form of phosphoserine in the proteins.
더보기1. Sarcoma 180 ascites tumor cells에서 histone 분획 f1, f2b, f2a2, f3 및 f2a1을 각각 추출 정제하여 각 분획을 acrylamide disc electrophoresis. $^{32}P$를 사용하여 in vitro에서 phosphorylation 및 amino 산 조성을 관찰하여 이 물질들의 성상을 밝혔다. 2. 마우스의 복수암 세포 및 간에 lysine-$^{14}C$을 in vivo에서 incorporate 시켜 histone의 생합성을 각 분획별로 비교 관찰하였다. 복수암 세포 histone 에서는 lysine-$^{14}C$이 f2b 분획에 가장 많이 incorporate 된 반면 f2a2가 가장 적었다. 분획 f3, f1 및 f2a1에는 차이가 없이 비슷하였다. 3. 복수암이 이식된 마우스의 간 histone에 lysine-$^{14}C$의 incorporate 된 비율은 분획 f2b가 다른 분획 보다 2배 높았고 분획 f1, f2a1, f2a2 및 f3는 거의 비슷하였다. 4. Lysine-$^{14}C$의 incorporation은 복수암 histone 분획들이 간 histone 분획 보다 1.5 배나 더 많이 일어났다. 5. 복수암 세포 histone의 amino 산 조성은 이미 보고된 소의 간, 신장 및 흰쥐의 간 histone과 비슷하였다. 또 소 흉선 histone의 amino 산 조성에 비하면 염기성 amino 산 함량이 낮은 것과 산성 amino 산에 대한 염기성 amino 산의 비율이 낮은 점을 제외하고는 유사하였다. 복수암 세포의 총 histone을 기타 정상조직 histone과 비교하면 proline과 methionine이 대단히 적었고 glutamic acid의 함량이 더 많았다. 복수암을 이식한 마우스 간의 총 histone 의 amino 산 조성은 정상조직과 비교하면 염기성 amino 산 함량이 높았으며 산성 amino 산 함량이 낮었다. 6. 복수암 세포의 핵을 in vitro 에서 $^{32}P$와 함께 incubate 하고 histone 각 분획에 incorporate 되는 비율을 관찰하였다. Histone 분획 f2b에 가장 많이 $^{32}P$가 incorporate 된 반면 분획 f2a1 및 f2a2에는 거의 incorporate 가 일어나지 않았다. 기타 분획에 incorporate 되는 비율은 큰 차이를 나타냈다. 즉 분획 f1이 f3 보다 높은 방사능을 나타냈다. 7. Phosphoserine을 복수암 세포의 histone 분획 f2b, f1 및 f3에서 분리 확인하였으며 이런 점으로 미루어 분획 f2b 단백질 내에 phosphoserine의 형태로 많은 량의 $^{32}P$가 incorporate 됨을 알 수 있었다.
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